Какви са нормите в количествения анализ за хепатит С?

Share Tweet Pin it

Вирусът на хепатит С може да се възпроизвежда в кръвните клетки и да причини лимфопролиферативни заболявания. Благодарение на множество мутации, имунната защита на организма се отслабва, появяват се генотипове и подтипове на вируса. С правилната и своевременна идентификация на определен тип зависи от ефективността на антивирусната терапия. Опасността от инфекция е, че болестта е асимптомна. Общо 15% от 100 пациенти могат да получат гадене и повръщане, загуба на тегло и повишена температура.

Определение на вируса на хепатит С

Стандартната норма на хепатит С е размерите от 40 до 60 nm, с по-голямата част от липидите, увреждане на черния дроб в резултат на остър или хроничен ход на заболяването. Хепатит С, а именно вирусът на RNA от фамилията Togaviridae, е изключително устойчив, предаден чрез кръвопреливане или използване на нестерилни предмети, неправилна хигиена на аксесоарите за баня, Количественият анализ ви позволява да изследвате кръвта и да идентифицирате генетичната структура на заразения вирус.

За хепатит С и неговите генотипи, които трябва да бъдат определени, се извършва количествен анализ. В зависимост от анализатора могат да се определят три нива на разпространение на РНК вируса.

Подтипите могат да произведат различни модификации, така че специфичността и чувствителността на анализатора трябва да бъдат сто процента. В допълнение към откриването на заболяване при пациент, е необходимо да се определи степента на неговата сериозност. Някои лаборатории нямат всички данни за определенията за вирус на РНК, има вероятност за фалшив положителен отговор.

Изследването за хепатит С ще бъде по-точно при изучаване на такива показатели:

Чертеж внимание на резултатите от тези показатели и общото състояние на организма, се показва резултата, което показва степента на заразяване, формата и броя на клетки в кръвта на хепатит С. Това допринася за лечебния процес и ефективността на антивирусната терапия.

Видове анализи за хепатит С

Полидираната верижна реакция (PCR) дава представа за количеството ДНК частици в анализите на пациента и правилно идентифицира причинителя на инфекцията.

Инфекциозните агенти могат да се проявяват. Такова инфекциозно чернодробно заболяване като хепатит С, в днешно време, е лечимо, когато се открие във времето. Ако се подозира наличието на вирус, се извършва PCR анализ.

Докато симптомите на вируса могат да бъдат маскирани за дълго време, човек може да не усети началото на хода на заболяването. Но при внимателно изследване в 60-70% от случаите се открива хепатит С, първичен анализ, при който е ELISA, след което се извършва PCR диагноза. Анализът се извършва в определени периоди, за да се определи степента на заболяването и да се предпише подходящо лечение. Правете без него, без да прилагате всички тези процедури, можете да присаждате от хепатит.

Качествен и количествен анализ

Има качествени и количествени анализи. Същността на първата е, че тя определя наличието на инфекция в кръвта. И това означава, че вирусът засяга здравите чернодробни клетки. Когато пациентът има антитела срещу хепатит С, веднага се извършва качествен тест. Нормата, която трябва да произведе резултатът, "не е открита в кръвта". При определяне на концентрацията на вируса съществува необходимост от познаване на чувствителността на диагностичната система, тъй като анализът може да бъде направен от хора, подложени на антивирусна терапия. Чувствителността на анализатора не трябва да бъде по-малка от 50 IU / ml.

Когато се открие вирус, се прави количествен анализ, с други думи вирусен товар, който определя концентрацията на вируса в кръвта и тежестта на заболяването.

Вирусната РНК, която е в определено количество кръв, се определя като нормата със скорост 1 ml на 1 сантиметър кубичен. След количествено определяне на вирусното натоварване е възможно да се прецени степента на инфекция на незаразената среда. Веднага след като концентрацията на хепатит С се повиши в кръвта, околната среда трябва да бъде изолирана.

Важно е на първите етапи да се открие степента на концентрация на хепатит, за да се определи темпото на рехабилитация. Ако честотата на хепатит С е превишена с повече от 800 хиляди IU / ml, тя се счита за твърде висока, с увеличение до един милион - критично. Ако количественият диапазон е по-малък от 400 хил. IU / ml, се счита, че замърсяването с други се появява с по-малка вероятност. Тази цифра показва, че хепатитът С в организма се намира в много малки дози. Анализът не е в състояние да определи количествената стойност на РНК на вирусните частици, така че е преразпределена няколко пъти за точността на диагнозата.

Резултати от количествения анализ

Задачата за определяне на количеството на вирусния товар в кръвта на пациента е да се определи степента на инфекция за другите.

Резултати от PCR анализ:

  1. Положителният отговор означава, че има наличие на инфекция в биологичния материал. Анализът ви позволява да определите точния брой на заразените клетки.
  2. Отрицателният отговор показва липсата на инфекция, която беше внимателно претърсена в тялото.

Количественият метод за хепатит С е точен и информативен, извършен върху оборудване с висока чувствителност. Разделянето на резултатите от анализа ви позволява да разберете дали има инфекция и нейната специфичност, за да видите най-малкия брой заразени клетки на анализатори с висока чувствителност.

Фалшивите положителни или противоположни резултати от анализа рядко дават, по-често се случва в проучвания на имуноанализ.

Количествен анализ на PCR за хепатит С

Има много подвидове на HCV, поради което не винаги е възможно да се изберат ефективни антивирусни лекарства и да се постигнат желаните резултати при лечението. Разнообразието от патогени се дължи на способността им да променят структурата си, т.е. да мутират. В резултат имунитетът няма време да образува мощен отговор срещу патогенния агент и лекарствата са неефективни.

Често хепатитът се диагностицира на етапа на цироза, което предразполага към по-късно откриване на заболяването поради липса на клинични признаци. Само чрез лабораторни изследвания може да се открие HCV в инкубационния период.

Количественият анализ за хепатит C прави възможно не само установяването на наличието на патогена в кръвта, но и изчисляването на неговата концентрация.

Препоръки за подготовка на анализа

Не се изисква специфична подготовка за лабораторна диагноза. Достатъчно е да се придържате към следните препоръки:

  1. количественият анализ се извършва на празен стомах, като последното хранене е 8 часа преди кръвната проба;
  2. за два дни трябва да се изостави алкохол и "тежки" ястия;
  3. Лекарствените продукти, които пациентът приема, са от особено значение. Те могат да повлияят на резултата от проучването, така че лекарят да знае за тях.

Също така, тежки физически усилия и физиотерапевтични процедури в навечерието на вземане на кръв не са желателни. За дешифриране на количествения анализ за хепатит С се оказаха надеждни, не пренебрегвайте горепосочените препоръки.

Често пациентът получава резултата от анализа за един ден. Цената на теста за определяне на концентрацията на патогена в кръвта зависи от лабораторията и качеството на реагентите и може да достигне 4000 рубли.

Лабораторна диагностика на хепатит С

Сред основните диагностични методи са ELISA или по друг начин ензимно-свързан имуносорбентен анализ. Той е назначен да открива специфични антитела срещу HCV. Ефективността му достига 95%. Ако преписът от изследването дава положителен резултат, струва си да се подозира наличието на агент в кръвта.

Следва да се отбележи, че половината от изследваните лица с тест "+" в хода на по-нататъшната диагностика не откриват вирусен агент в кръвта. В този случай ELISA показва предишен контакт с HCV в миналото, което се потвърждава от циркулиращите антитела.

По-точно изследване е полимеразна верижна реакция или PCR. Тя позволява да се определи концентрацията на РНК на патогена в кръвта. След откриването на генетичния комплект на вируса в биологичен материал, лекарят потвърждава хепатита С.

PCR се присвоява на пациента за потвърждаване на диагнозата. Това прави възможно идентифицирането на РНК на етап, в който антителата все още не са налични. Има няколко типа генетични изследвания:

  1. количествен анализ на PCR за хепатит С, който не само установява присъствието на патогена в кръвта, но и предоставя информация за неговата концентрация;
  2. качество - потвърждава инфекцията;
  3. генотипизиране - позволява да се определи генотипът на патогенния агент и да се изберат най-ефективните лекарства срещу него.

Полимеразна верижна реакция

Както вече беше споменато, има няколко вида лабораторни изследвания:

  • качествен анализ - показва наличието на патогенен агент в кръвта. Този тип диагноза има определено ниво на отговор, така че не винаги е надежден. За да се разбират правилно резултатите и да се получат реални показатели, се препоръчва да се използва тестова система с чувствителност от поне 50 IU / ml за проучването. Нормата на анализа е "отрицателен отговор" или "вирусът не се открива". Това показва липса на генетичен пакет от патогени в тествания материал. Ако резултатът е положителен, се изисква допълнително изследване на пациента;
  • количественият анализ на PCR за хепатит С определя вирусния товар, т.е. концентрацията на патогенния агент в кръвта. Резултатът от изследването показва броя на РНК единици в определен обем биологична течност;

Вирусното натоварване е броят на инфекциозната РНК в един милилитър кръв на изследователя. Измервателните единици са ME / ml, но някои лаборатории определят "копия / ml", като посочват празното място на стандарта за анализ за сравнение и оценка на резултатите.

  • определяне на генотипа. Поради способността на патогена да промени избора на ефективни антивирусни лекарства за терапия трябва да се основава на неговия генотип. Това зависи не само от резултата, но и от продължителността на курса на лечение. Така че HCV 1 хепатитът изисква лекарства за една година, но само 60% от случаите показват положителна динамика. Що се отнася до втория и третия генотип, те са по-малко резистентни на действието на антивирусните агенти, поради което ефективността на терапията надхвърля 85%. При получаване на такъв резултат от изследването - "вирусът не е въведен", струва си да се подозира наличието на агент, който не е разпознат от стандартните системи за тестване.

Индикации за анализ

Тълкуването на количествения анализ за хепатит С е необходимо за:

  1. по-нататъшно изследване на пациента, когато антитела срещу HCV са открити с ELISA;
  2. потвърждаване на диагнозата;
  3. установяване на вирусно натоварване при смесена инфекция, когато дадено лице е заразено с няколко вида патогени;
  4. определяне на терапевтични тактики (избор на антивирусни лекарства, тяхното заместване или завършване на терапията);
  5. оценява динамиката на прогресията на заболяването, както и ефективността на лекарствата;
  6. определяне на стадия на патологията (остър, хроничен).

PCR има следните предимства:

  1. добра чувствителност, благодарение на която е възможно да се отчита дори малко количество вирус;
  2. определяне на самия патоген (РНК), а не на антигени;
  3. специфичност на техниката - установяване на специфичен вид патогенен агент;
  4. скоростта на получаване на резултати, тъй като за анализа не е необходимо култивиране на култури върху хранителна среда. Отговорът е готов за 5 часа;
  5. универсалност - позволява да се идентифицира генетичен набор от различни патогени, както РНК, така и ДНК-съдържащи (хепатит В);
  6. откриване на латентна инфекция.

Лабораторният тест помага да се потвърди диагнозата и е неразделна част от цялостното изследване (анализ на клиничните симптоми, резултатите от ELISA и биохимията).

В допълнение, PCR се използва широко в алергологията, генетиката, както и за установяване на факта на бащинството.

Декодиране на количествен анализ за вируса на хепатит С

Оценката на резултатите от лабораторната диагностика се извършва от лекар, като се сравняват получените данни с нормата.

Разновидности и необходимост от използване на PCR изследвания

Вирусът на хепатит С е вирус, който съдържа РНК молекула. Той е в състояние да избегне имунния отговор на организма, поради високи способности за мутация. Има шест основни генотипа на вируса и много подвидове. В нашия регион се срещат главно 1, 2 и 3 генотипа.

При 75-80% от заболяването преминава в хронична форма, която причинява чернодробна фиброза - състояние, при което чернодробната тъкан е заменена с съединителна тъкан. Фиброзата, от своя страна, води до рак или цироза. Основният начин на предаване на болестта е чрез кръвта. Ако дадено лице има указание за тест за хепатит С, се извършват два основни теста. Идентифицирайте антитела срещу вируса и в отсъствието им се смята, че няма хепатит. Ако в кръвта се открие наличие на антитела срещу вируса на хепатита, се извършва PCR анализ.

РНК този метод се определя в кръвта вече 10-12 дни след инфекцията и показва, че вирусът активно се умножава в организма. През този период е просто невъзможно да се открие вирус по друг начин, тъй като той все още не произвежда специфични антитела, а чернодробните лезии все още са невидими в биохимичните анализи и биопсии.

Разновидности на изследванията, използващи метода на PCR

Анализът чрез полимеразна верижна реакция има някои предимства:

  1. При такова проучване самият вирус се определя, а не продуктите от неговата жизненоважна дейност. В този случай е възможно да се определи вида на патогена.
  2. Техниката има висока специфика поради факта, че само определена област на ДНК е изследвана, вероятността за получаване на погрешни резултати намалява.
  3. Тя има много висока чувствителност, дори и минимално количество вирус в кръвта се открива.

Съществуват два основни метода за кръвни тестове за хепатит С с PCR: качествен и количествен PCR анализ. За определяне на наличието на вирус се използва качествен метод. На всеки, който има антитела срещу хепатит в кръвта, се прави анализ. Резултатът може да бъде само два типа: "открит" и "не е открит", последната стойност се счита за норма.

Положителен резултат от теста означава, че в пробата са открити фрагменти от вирусната РНК, което от своя страна показва, че лицето е заразено с хепатит. В случай на отрицателен резултат са възможни две възможности: няма инфекция или концентрацията му е толкова ниска, че не се открива от тази техника.

Количественият метод се различава по същество в проучването, според задачите и показанията. Не всички пациенти с хепатит преминават такъв анализ. Той, както всеки друг, има конкретни цели. Определянето на вирусното натоварване или количественият анализ на РНК върху РНК на вируса се използва:

  • да се определи РНК на вируса в кръвта и диагнозата "вирусен хепатит";
  • да предсказва хроничен хепатит и хода на заболяването;
  • за мониториране на антивирусното лечение и за вземане на решение за продължаване, намаляване или промяна на тактиката на лечение.

Проучването се провежда, ако има такива признаци:

  • хепатит С се открива в качествени изследвания и в кръвта се откриват антитела;
  • със смесен хепатит;
  • ако е планирана антивирусна терапия;
  • по време и след лечение за хепатит С;
  • в присъствието на хроничен и остър хепатит С.

Изпитването се извършва, за да се оцени броят на единиците от вируса в даден обем кръвна проба от 1 cm3 или 1 ml. Резултатите са дадени на фигури. Индексите се използват: IU / ml, което означава международната единица на милилитър и копия на милилитър, броя копия на РНК в проба от 1 ml. Колкото по-голям е количественият показател на анализа, толкова по-голяма е вероятността от предаване на вируса на друго лице.

Р-ДНК е метод на разклонена ДНК. По-прост и евтин метод. Използва се за повече проби и има ниска чувствителност от 500 IU / ml. При такава чувствителност е възможно да не се открие вирусът, дори ако е налице в кръвта.

ТМА е метод за транскрипционно амплифициране. Тази техника разкрива нуклеинови киселини в кръвта. Има ниска цена и висока чувствителност от 5-10 IU / ml. Сравнително нова техника, която позволява ускоряване и намаляване на разходите за тестване.

Резултатите от количествения анализ на определянето на вирусната РНК, представени от лабораторията, се интерпретират, както следва:

Анализ на PCR за хепатит

PCR на хепатит С

  1. РНК на хепатит С ( "PCR-качество") - откриване при анализа на кръвта е доказателство за остър или хроничен хепатит С се определя от седмица 2-ри на инфекция се появява преди анти-HCV, което позволява да се диагностицира заболяването в ранните стадии. Определяне на РНК се извършва при пациенти с клинично остър хепатит В и пациенти с положителен тест за хепатит.
  2. РНК на хепатит С ("Количествен PCR") - вирусен товар - един от показателите за ефективността на антивирусната терапия и нейната оценка (чрез промяна на нивото от първоначалната стойност). Количествената характеристика на съдържанието на РНК на хепатит С е важна за оценка на ефективността на антивирусната терапия и има прогностично значение за определяне на хроничността. Пациентите с високо вирусно натоварване (високо количество РНК) преди лечението реагират по-лошо на лечението.
  3. РНК на хепатит С (генотипове 1, 2, 3) - Видът лечение зависи от вида и ефективността му. Болестта, причинена от вируса на генотип 1, е най-неблагоприятна по отношение на прогнозата за ефективността на терапията. Съгласно настоящите препоръки трябва да се направи кръвен тест за нас генотипиране на хепатит С преди началото на антивирусната терапия.
  4. РНК на хепатит С (разширено генотипиране 1а, 1b, 2, 3а, 4, 5, 6) - на територията на Русия циркулират 1a, 1b, 2a, 2c, 2k, 3a подтипове. Хепатит С, причинен от вируса на генотипове 1 и 4, е най-неблагоприятният по отношение на прогнозата.
  5. Ултрачувствителна PCR за хепатит С (качествен метод) - анализът се използва за диагностициране на болестта в ранните стадии на инфекция, е оптимален за тестване на кръводаряване и за оценка на отговора на антивирусно лечение. Това изследване, дори ако се открият антитела срещу хепатит С, се препоръчва да се провежда пациенти с чернодробно заболяване неуточнени причини, с придобита имунна недостатъчност, или на имуносупресивна терапия.
  6. Ултрачувствителна PCR за хепатит С (количествен метод) - уникален анализ с висока чувствителност (10 IU / ml) за определяне на РНК на вируса на хепатит С в количествено изражение. Проучването се използва за мониторинг на ефективността на терапията.

PCR на хепатит B

  1. ДНК на хепатит В (качествен анализ) - индексът на възпроизвеждане на вируса на хепатит B. Появява се първо в кръвта, средно 1 месец след инфекцията. В някои случаи той е единственият маркер на латентна инфекция с HBV. Определянето на ДНК на вируса позволява да се диагностицира хепатит В, причинен от мутантни щамове, при които не се откриват други маркери на инфекцията.
  2. ДНК на хепатит В (количествен анализ) - Концентрацията на ДНК (вирусен товар) е един от тестовете, използвани за определяне на стадия на хроничен хепатит В и ефикасността на антивирусната терапия. Анализът се извършва преди и по време на лечението.
  3. Генотипизиране на хепатит В - заболяванията, причинени от различни генотипове на вируса, могат да се различават в клиничния курс и изхода. Хепатит В, причинен от вируса на генотип С, често приема хроничен курс и има висок риск от трансформация в цироза на черния дроб или хепатоцелуларен карцином. Пациентите, инфектирани с генотип А вирус, реагират по-добре на лечението.
  4. Ултрачувствителна ДНК-PCR за хепатит В (качествен метод) - ги предаде за ранно откриване на болестта. Високо информативен в изследването на донорната кръв. Може да се използва за потвърждаване на спонтанно или индуцирано от лечението отстраняване на вируса от човешкото тяло.
  5. Ултрачувствителна PCR за хепатит С (количествен метод) - диагностициране на ДНК на вируса на хепатит В в количествено отношение. Анализът се прави, за да се оцени ефективността на терапията.
  6. Определяне на мутации на резистентност към антивирусни лекарства ламивудин, телбивудин, ентекавир, адефовир, тенофовир (приложен заедно с анализа на "количествена ДНК на хепатит В"). За да се премине анализът е необходим при пациенти с хроничен хепатит В преди началото на антивирусната терапия и при прилагане на лекарства. Резултатът съдържа информация за наличието на резистентност към вируса на хепатит В към антивирусни лекарства:
    • R - вирусът е резистентен на антивирусното лекарство (са открити резистентни мутации към това лекарство);
    • S - вирусът на хепатит В е чувствителен към лекарството (нормативната стойност, не се откриват мутации на резистентност);
    • I - причиняващият агент на инфекцията може да предизвика резистентност към това лекарство.

№350SV, Количествено определяне на HCV РНК чрез PCR [вирусен товар] (HCV вирусния товар, Хепатит С вирус РНК (количествен тест)) в серум

Определяне на РНК на вируса на хепатит С в серума чрез полимеразна верижна реакция (PCR) с откриване в реално време.

детектируемият фрагмент е специфичен регион на РНК на вируса на хепатит С; специфичността на определянето е 100%. Чувствителността на определянето е 60 IU / ml. Линеен диапазон: 10 ^ 2 - 1х10 ^ 8 IU / ml.

  • Положителен качествен тест за наличието на РНК на вируса на хепатит С в кръвния серум.
  • Определяне на вирусното натоварване.
  • Определяне на тактиката на лечение на пациентите.
  • Точна оценка на ефективността на лечението.

Тълкуването на резултатите от изследването съдържа информация за лекуващия лекар и не е диагноза. Информацията от този раздел не може да се използва за самодиагностика и самолечение. Точната диагноза се прави от лекаря, като се използват както резултатите от това изследване, така и необходимата информация от други източници: анамнеза, резултатите от други проучвания и др.

Мерни единици: количеството на РНК на вируса на хепатит С, изразено в IU / ml. За преизчисляване в копия / ml трябва да се приложи съотношението IU = 2,5 копия на HCV РНК.

  • Основна информация
  • Примери за резултати

* крайният срок не включва деня на вземане на биоматериал

PCR с откриване в реално време.

примери за резултати от формуляра *

* Обръщаме вашето внимание на факта, че когато поръчвате няколко изследвания, няколко резултата от теста могат да бъдат отразени в един формуляр.

В тази секция можете да разберете колко изпълнението на изследването в града ви, прочетете описанието на теста и тълкуването на таблицата с резултатите. Изборът къде да се тества, "Количествено определяне на HCV РНК чрез PCR [вирусен товар] (HCV вирусния товар, вируса на хепатит C РНК (Количествен тест)) в серума" в Москва и други руски градове, не забравяйте, че анализът на цените, разходите за процедурата за вземане на проби от биоматериали, методите и времето за изследване в регионалните медицински кабинети може да се различават.

Хепатит С. Количествен анализ. Норм, тълкуване на резултатите

Хепатит С. Какво е опасно за хората. Как да диагностицираме инфекция. Какво трябва да направите за анализа

Хепатит С. Това е опасно. Как да го идентифицираме във времето.

Хепатит С вирус или HCV е инфекциозно заболяване, което носи молекула на рибонуклеинова киселина.

Този вид вирус може лесно да се адаптира към условията на живот и често се трансформира в различни форми на болестта, така че защитната система на тялото ни е толкова трудна за справяне. Шест основни генетични видове инфекция и десетки подтипове са класифицирани. В нашия регион често се срещат първите три вида вируси.

Според статистиката едва една четвърт от случаите на HCV заболяване се появяват без усложнения, във всички останали случаи норма, ако инфекцията се развива в хроничен процес, който оказва неблагоприятно въздействие върху вътрешните органи. Така че хепатитът може да бъде усложнен от чернодробната фиброза - процесът на заместване на чернодробните клетки. Други усложнения се развиват чрез верижна реакция: в резултат на фиброзата има тумори на тумора, чернодробното заболяване се развива в цироза.

В повечето случаи инфекцията навлиза в човешкото тяло през кръвоносните съдове. Диагностицирайте вируса на хепатит С по няколко начина. Проследява се нивото на концентрация на антитела срещу HCV. Инфекцията не се е появила, ако в кръвта на пациента не бяха открити антитела срещу нея. В противен случай вирусът се изследва по-дълбоко, провежда се друг тест - PCR. Само по този начин дава възможност за идентифициране на вирусната РНК след само една година и половина седмици след заразяването, в момент, когато тялото не разполага с време, за да започне производството на антитела към инфекцията, както и замърсяване ефекти не са отразени в общото състояние, особено в резултатите от други изследвания, като BAC и биопсия.

Анализ на PCR върху РНК: количествен и качествен. Обяснение на резултатите

Вирусно натоварване или количествен PCR анализ - анализ за определяне на нивото на инфекция в плазмата. Всъщност количественият анализ е броят на молекулите на инфекциозната рибонуклеинова киселина в един милилитър кръв.

Р-ДНК е бърз, евтин и не най-точен количествен начин за откриване на вирус въз основа на откриването на клетки с разклонена ДНК. Това изследване може да не идентифицира наличната инфекция в организма поради лоша чувствителност - около 450 IU / mL.

Количественият метод за транскрипционно амплифициране позволява да се намерят РНК клетки в тялото. Този метод изглеждаше сравнително наскоро, е евтин и е достатъчно ефективен диагностичен инструмент. Чувствителността на теста е около 10 IU / ml.

Нека се опитаме да обясним резултатите от тестовете. По-долу има таблица и препис.

PCR-изследване за хепатит С: видове, индикации, препис

Вирусният хепатит С е сериозно заболяване, което се проявява при чернодробно увреждане. В осемдесет процента от пациентите преминава в хронична форма. Вирусът се умножава в чернодробните клетки - хепатоцити - и причинява тяхната смърт. Мъртвата тъкан се замества с фокуси на съединителната тъкан, развива се фиброза.

С развитието на чернодробна фиброза е в състояние да изпълнява функцията си, започва цироза, което е опасно за неговите усложнения: увеличаване на налягане в порталната вена, стомашно-чревно кървене, нарушена кръвосъсирването, психически промени, дължащи се на увреждане на мозъка ядра токсични продукти.

Причината за заболяването е инфекция с вирус от семейство Flaviviridae, който е вид вирус на РНК. Това означава, че генетичният материал, с който се синтезират протеините на патогена, е кодиран в молекула на рибонуклеинова киселина. Инфекцията се осъществява чрез кръвта, сексуално и от бременна жена до плода. За съжаление, между инфекцията и началото на производството на антитела може да мине доста време - от две седмици до шест месеца. Това не позволява да се определи инфекцията по метода на ензимния имуноанализ и да се започне лечение в ранните етапи.

Какво представлява PCR анализът?

PCR е метод на молекулярен анализ, който позволява откриването на генетичния материал на патогена още в първата седмица след инфекцията като се използва полимеразна верижна реакция. Проучването има висока специфика, точност и позволява не само да се определи наличието или липсата на вируса, но и неговата концентрация и генотип.

За проучването вземете кръвта на пациента, в който потенциално може да бъде открита РНК на вируса. Кръвта се добавя праймери - изкуствено синтезирани порции къса дължина на желания ген, и РНК полимераза - специален ензим, който умножава сумата на генетичен материал на патогена. С помощта на специален апарат се извършват няколко цикъла на отопление и охлаждане. След това материалът се анализира и се сравнява с известни гени на вируса, въз основа на които заключение за наличие или липса на инфекция.

Видове PCR анализ за хепатит С

Има три вида PCR анализи:

  1. Качествен PCR анализ. Първият етап от проучването. Тя ви позволява да идентифицирате генетичния материал на вируса в кръвта.

  • Количествен анализ на PCR. Тя позволява да се определи вирусното натоварване - концентрацията на генетичния материал на патогена в един милилитър кръв. Това проучване се провежда преди началото на терапията, а след това на първата, четвъртата, дванадесетата и (ако курсът е дълъг) на двадесет и четвъртата седмица от лечението, за да се оцени нейната ефективност.

  • определяне на генотипа. Причиняващият агент на хепатит С често и бързо мутира. На планетата са открити седем варианта на генотипа на този вирус. В Русия първият, вторият и третият тип са често срещани. Всеки от генотипите има различна устойчивост към терапия, например, ефективността на лечението на първия тип е 60%, а за втория и третия - до осемдесет и пет. Следователно, за да се изберат подходящи лекарства и да се предпише курс на лечение с достатъчна продължителност, е необходимо да се определи точно кой тип вирус е заразен с пациента.
  • Индикации за PCR анализ за хепатит С

    Изследването на PCR е предписано в следните случаи:

    • контакт с болно лице, което може да доведе до инфекция;
    • положителен ензимно-свързан имуноанализ;
    • признаци на чернодробна цироза: промени в черния дроб, увеличен далак, появяване на подкожен венозен плекс на корема;
    • появата на симптоми на чернодробно увреждане: болка в дясната страна на корема, пожълтяване на кожата;
    • повишена активност на ALT и AST при биохимичен кръвен анализ;
    • преди началото на лечението, за да се определи вирусното натоварване;
    • да наблюдава ефективността на антивирусната терапия;
    • след приключване на лечението за мониториране на рецидив;
    • в присъствието на диагностициран хепатит В, за да се изключи смесеното увреждане на черния дроб.

    Декодиране на PCR-изследване за хепатит С

    Декодирането на PCR анализа и ензимния имуноанализ за хепатит С трябва да се адресира от специалист по хепатология или инфекциозна болест. Анализирането на резултатите от PCR е необходимо в комбинация с биохимичен кръвен тест, биопсия и ултразвук. Само квалифициран лекар ще може да анализира резултатите от проучванията и въз основа на тях да предпише правилното лечение.

    Декодиране на качествен анализ.

    Генетичният материал на патогена е намерен в анализирания биологичен материал. Инфекцията е потвърдена.

    Няма инфекция или количеството РНК на патогена е под границата на чувствителност.

    Декодиране на количествен анализ.

    Нормална цифра за здрави хора. Това означава, че в тествания материал няма РНК на хепатит С, или неговата концентрация е под прага на чувствителността на изследването.

    Концентрацията на РНК е под диапазона на количествено определяне. Такива резултати се интерпретират много предпазливо, корелират ги с данните от други проучвания, често извършват второ проучване.

    Нивото на вирусното натоварване при дадена концентрация се счита за ниско. Обикновено намаляването на количеството на вируса означава, че терапията е успешна.

    Повече от 8 * 10 ^ 5 IU / ml

    Нивото на вирусното натоварване при дадена концентрация се счита за високо.

    Повече от 2.4 * 10 ^ 7 IU / ml

    Количеството на РНК е над горната граница на обхвата на количественото определяне. Заключение за степента на вирусното натоварване с този резултат е невъзможно. Обикновено в такива случаи изпитването се повтаря с разреждането на кръвната проба.

    Декодиране на генотипа.

    РНК от специфичен генотип е открита

    В биоматериала се открива вирус на хепатит С със специфичен генотип и подтип. Резултатът е кодиран с римски цифри и латински букви, например - 1а, 2b. Има седем генотипа и шестдесет и седем подтипа, но в Русия има само три първи типа.

    Бе открит РНК на вируса на хепатит С.

    В кръвта РНК е рядък генотип за Русия, който не може да бъде приписван на първия, втория или третия тип. Необходими са повече изследвания.

    Този резултат показва, че пациентът е здрав или че нивото на РНК на патогена е твърде малко.

    Положението е възможно, когато PCR анализът за хепатит С е отрицателен, а ензимният имуноанализ открива антитела срещу вируса. Това означава, че пациентът е имал хепатит С в остра форма и се е излекувал. Приблизително двадесет случая на инфекция водят до спонтанно излекуване, ако тялото на пациента оказва достатъчно устойчивост към инфекция.

    Въпреки факта, че PCR е много точен анализ, неговите резултати могат да бъдат изкривени в следните ситуации:

    • кръвта е транспортирана до лабораторията при неадекватни условия, температурният режим е нарушен;
    • пробата от биоматериал е била замърсена;
    • в кръвта има остатъчни следи от хепарин и други антикоагуланти;
    • В изследваното вещество са инхибитори - вещества, които забавят или спират полимеразната верижна реакция.

    Предимства на PCR при други методи

    1. Диагноза в ранните етапи. PCR открива генетичния материал на причинителя на заболяването. С помощта на имунофлуоресцентен анализ е възможно да се определят само имуноглобулини - вещества, които тялото произвежда в отговор на инфекция. В случай на инфекция с хепатит С, интервалът между инфекцията и началото на имунния отговор може да бъде няколко седмици и месеци, през което време ELISA няма да бъде ефективен. PCR ще даде отговор още през първата седмица след инфекцията.

  • Ниска вероятност за грешка. В проучвания материал се определя генетичният материал, който е характерен само за един вид патогени. Това ви позволява да изключите неверни резултати. При ELISA са възможни грешки, тъй като един и същ вид антитела може да бъде освободен срещу различни вируси - такива антитела се наричат ​​кръстосано реактивни.

  • Висока чувствителност. PCR може да открива РНК на патогена дори в минимални количества. Това прави възможно идентифицирането на скрити инфекции.
  • Как да се подготвим за доставка на кръв за PCR изследвания

    За PCR анализ се събира венозна кръв за хепатит С. Обикновено две части от кръвта се вземат от вената на пациента веднага: първата се изпраща на PCR, а втората - на ELISA. Това се прави, за да се прецени по-точно колко зле е заразен пациентът с вируса и как имунитетът се бори срещу него.

    Обикновено се изискват следните правила за пациента:

    • кръвният тест се взема сутрин;
    • прекъсването между последното хранене и предаването на кръвта трябва да бъде от осем до десет часа;
    • два или три дни преди анализа трябва да се откажете от пържени и мазни храни и алкохол;
    • за двадесет и четири часа преди анализа, пациентът трябва да избягва физическо натоварване: не носете тежести, не посещавайте фитнес зала или басейн.

    Маркери на хепатит С и тълкуване на резултатите от количествения анализ на HCV РНК

    Напоследък в търсачките на интернет ресурси често се появява заявката "количествен анализ на хепатита с декодиране".

    В действителност, хепатитният вирус е чест и опасен, болестта засяга черния дроб. Името му идваше от латвийката. хепатит - възпаление на черния дроб. Инфекцията се случва чрез кръвта или чрез сексуален контакт, възрастни са по-склонни да се разболеят на възраст от 25 до 50 години.

    Има няколко вида болести. Хепатит С няма ярък израз, но в 40-70% от случаите той преминава в хронична форма, може да причини цироза на черния дроб и рак. Това заболяване изисква точна диагноза и тълкуване на получените данни, за които се разработват методите. Едната е РНК анализ на HCV РНК чрез PCR.

    РНК анализ на HCV РНК чрез PCR

    РНК (рибонуклеинова киселина) е вид макромолекула, един от компонентите на живата клетка. РНК отговаря за кодирането на генетичната информация. Вирусът на хепатит С съдържа РНК молекула и има навика да мутира. Има шест от неговите подтипове, както и много подвидове.

    Болестта в хроничния стадий води до фиброза на черния дроб - нарастват съединителните тъкани, структурата на органа постепенно се нарушава. Фиброзата се поддава на своевременно лечение, тъй като черният дроб не е претърпял все още разрушителни процеси. За разлика от цирозата, тежко необратимо чернодробно заболяване, при което фиброзата може да се развие, без да се вземат необходимите мерки навреме.

    Лице, което има подозрение, че има вирус на хепатит, определя антитела срещу него. Ако те не са налице - заболяване се изключва, в тяхно присъствие прибягват до метод PTSR (полимерна верижна реакция). В молекулярната биология тя е експериментална, но заема водещо място сред методите за диагностициране на инфекциозни заболявания. С помощта на него може значително да се увеличи концентрацията на фрагменти от молекули в пробата. 10 дни след заразяването, РНК вече е възможно да се открие в кръвта.

    Този метод е единственият, който позволява да се идентифицира болестта в ранните етапи. По друг начин (напр. Биохимичен кръвен тест) това не може да се направи, тъй като черният дроб все още не е засегнат.

    Методът е открит през 1993 г. от биохимика Кари Мълис, за която получава Нобелова награда. PCR е пробив в медицината и науката, тъй като позволява бърза и точна идентификация на инфекции в кръвта и други биологични материали на човек. С други думи, методът ускори развитието на диагнозата на инфекциозни заболявания.

    РНК анализът на HCV РНК чрез PCR е ефективен поради следните причини:

    • Има добра чувствителност - дори се открива малко количество вирус в кръвта;
    • самият вирус се определя, а не страничните продукти, създадени от него;
    • се определя видът патоген.

    Разлики в количествения анализ на HCV РНК от качествен

    Методът на PCR включва два основни метода за изучаване на биологичен материал за търсене на вируса на хепатит С:

    Тези проучвания имат различни задачи.

    Качествен анализ на хепатита с декодиране потвърждава наличието на вируса, след като антителата към болестта вече са открити в кръвта. Ако проучването даде положителен резултат, тогава заболяването е установено. С други думи, човек е заразен. Ако се получи отрицателен резултат, това означава, че лицето не е заразено или има твърде малко концентрация на вируса. Тази концентрация не се открива по този начин.

    Освен това клиничната картина на заболяването се основава на маркери за хепатит С и тълкуване на анализа. Основните маркери са имуноглобулините (антителата) М и Ж. Тяхното присъствие в кръвта на пациента показва нехарактерни процеси за здрав организъм. Въз основа на наличието на тези антитела пациентът обикновено се диагностицира с първична диагноза.

    Количествен анализ се предписва за първоначално откриване на антитела и, ако е необходимо, за лечение.

    Също така се предписва количествен анализ за хепатит С за откриване на смесен хепатит (инфекция с няколко вируса).

    Количественият анализ с декодиране се осъществява с цел:

    • изясняване на окончателната диагноза;
    • подреждане на прогнозите относно хода на заболяването и неговото лечение - удължаване, намаляване на лечението или промяна в тактиката;
    • мониторинг на терапията.

    За да сте сигурни, че резултатите са верни, трябва да следвате предписания режим, преди да дарите кръвта:

    • дойдете в лабораторията на празен стомах, последният път, когато можете да приемате храна, може да бъде 8 часа преди процедурата;
    • два дни преди изследването са забранени алкохолът, мазнините и пържените храни;
    • ултразвук, масаж, физиотерапия преди изследването не може да се проведе;
    • за деня, приемането на лекарства е забранено, ако приемането на отделни лекарства не може да бъде отменено, това се съобщава преди вземане на кръвни проби;
    • преди процедурата се препоръчва максимално да се намалят физическите и нервните натоварвания.

    Изпълнението на тези изисквания ще бъде ключът към получаване на правилните резултати от количествения анализ за хепатит С.

    Декодиране на количествен анализ

    След получаване на индикаторите за количествен анализ е необходимо да се разчитат резултатите от тестовете за хепатит С. Резултатите се изчисляват както в единици ME / ml, така и в копия на ml. За да се получат резултатите, отразени в копието, се използват няколко метода.

    • HCV монитор (конверсионен фактор за ME - 2,7);
    • LCX HCV РНК (конверсионният фактор за ME е 3.8).

    Таблица. Декодиране на количествен анализ на HCV РНК чрез PCR.

    Хепатит с декодиране на количествен анализ

    Вирусът на хепатит С може да се възпроизвежда в кръвните клетки и да причини лимфопролиферативни заболявания. Благодарение на множество мутации, имунната защита на организма се отслабва, появяват се генотипове и подтипове на вируса. С правилната и своевременна идентификация на определен тип зависи от ефективността на антивирусната терапия. Опасността от инфекция е, че болестта е асимптомна. Общо 15% от 100 пациенти могат да получат гадене и повръщане, загуба на тегло и повишена температура.

    Определение на вируса на хепатит С

    Стандартната норма на хепатит С е размерите от 40 до 60 nm, с по-голямата част от липидите, увреждане на черния дроб в резултат на остър или хроничен ход на заболяването. Хепатит С, а именно вирусът на RNA от фамилията Togaviridae, е изключително устойчив, предаден чрез кръвопреливане или използване на нестерилни предмети, неправилна хигиена на аксесоарите за баня, Количественият анализ ви позволява да изследвате кръвта и да идентифицирате генетичната структура на заразения вирус.

    За хепатит С и неговите генотипи, които трябва да бъдат определени, се извършва количествен анализ. В зависимост от анализатора могат да се определят три нива на разпространение на РНК вируса.

    Подтипите могат да произведат различни модификации, така че специфичността и чувствителността на анализатора трябва да бъдат сто процента. В допълнение към откриването на заболяване при пациент, е необходимо да се определи степента на неговата сериозност. Някои лаборатории нямат всички данни за определенията за вирус на РНК, има вероятност за фалшив положителен отговор.

    Изследването за хепатит С ще бъде по-точно при изучаване на такива показатели:

    Чертеж внимание на резултатите от тези показатели и общото състояние на организма, се показва резултата, което показва степента на заразяване, формата и броя на клетки в кръвта на хепатит С. Това допринася за лечебния процес и ефективността на антивирусната терапия.

    Видове анализи за хепатит С

    Полидираната верижна реакция (PCR) дава представа за количеството ДНК частици в анализите на пациента и правилно идентифицира причинителя на инфекцията.

    Инфекциозните агенти могат да се проявяват. Такова инфекциозно чернодробно заболяване като хепатит С, в днешно време, е лечимо, когато се открие във времето. Ако се подозира наличието на вирус, се извършва PCR анализ.

    Докато симптомите на вируса могат да бъдат маскирани за дълго време, човек може да не усети началото на хода на заболяването. Но при внимателно изследване в 60-70% от случаите се открива хепатит С, първичен анализ, при който е ELISA, след което се извършва PCR диагноза. Анализът се извършва в определени периоди, за да се определи степента на заболяването и да се предпише подходящо лечение. Правете без него, без да прилагате всички тези процедури, можете да присаждате от хепатит.

    На първо място идва качествен анализ, който потвърждава само хипотезата за инфекцията и след това количествена, определяща натоварването върху черния дроб. Идеалният вариант е отрицателен резултат за хепатит С в генетичния материал на пациента.

    Качествен и количествен анализ

    Има качествени и количествени анализи. Същността на първата е, че тя определя наличието на инфекция в кръвта. И това означава, че вирусът засяга здравите чернодробни клетки. Когато пациентът има антитела срещу хепатит С, веднага се извършва качествен тест. Нормата, която трябва да произведе резултатът, "не е открита в кръвта". При определяне на концентрацията на вируса съществува необходимост от познаване на чувствителността на диагностичната система, тъй като анализът може да бъде направен от хора, подложени на антивирусна терапия. Чувствителността на анализатора не трябва да бъде по-малка от 50 IU / ml.

    Когато се открие вирус, се прави количествен анализ, с други думи вирусен товар, който определя концентрацията на вируса в кръвта и тежестта на заболяването.

    Вирусната РНК, която е в определено количество кръв, се определя като нормата със скорост 1 ml на 1 сантиметър кубичен. След количествено определяне на вирусното натоварване е възможно да се прецени степента на инфекция на незаразената среда. Веднага след като концентрацията на хепатит С се повиши в кръвта, околната среда трябва да бъде изолирана.

    Важно е на първите етапи да се открие степента на концентрация на хепатит, за да се определи темпото на рехабилитация. Ако честотата на хепатит С е превишена с повече от 800 хиляди IU / ml, тя се счита за твърде висока, с увеличение до един милион - критично. Ако количественият диапазон е по-малък от 400 хил. IU / ml, се счита, че замърсяването с други се появява с по-малка вероятност. Тази цифра показва, че хепатитът С в организма се намира в много малки дози. Анализът не е в състояние да определи количествената стойност на РНК на вирусните частици, така че е преразпределена няколко пъти за точността на диагнозата.

    Какво представлява PCR?

    Днес има много различни заболявания. И не по-малко брой методи за тяхното определяне. Тъй като агентите за инфекция са се научили лесно да се привикнат към околната среда и да се развиват, най-новите технологии се използват за диагностицирането им. Полимеразната верижна реакция (PCR) е по-бърз и по-точен метод, който има за цел да намери причинителя на заболяването, като значително увеличи дела на ДНК на вируса на хепатита в пробата. Често се пише за: търсене на игла в купа сено и изграждане на куп с игли.

    Видове PCR метод

    Посочете качествен и количествен анализ на хепатита. За да се определи дали вирусът е в тялото и тези, които са открили антитела срещу хепатит С, проверете качественото тестване. Анализът на анализа дава резултата: "положително"; "Negative". Отрицателното значение означава: или човекът е здрав, или агенти в кръвта не са достатъчни и не могат да бъдат намерени. Поради това си заслужава да се проведе второ проучване след известно време.

    Положителният резултат показва наличието на инфекция. Това е почти винаги точна стойност. Грешните резултати обикновено зависят от човешкия фактор (неправилно съхранение или неспазване на правилата на процедурата). При норма, резултатът е отрицателен. Преди теста няма специални правила, просто вземайте кръв от вената.

    Ако се установи, извършете количествен анализ (вирусен товар) - той дава цифрови стойности: колко РНК на вируса на хепатит в момента е в предписания обем на тествания материал. При активно развитие на инфекцията, тя може да бъде намерена на заразеното лице в продължение на 1-2 седмици. Обикновено се изследва и кръвта, защото агентите в нея циркулират свободно.

    Характеристики на количествен PCR анализ

    Разликата в количествения анализ е, че не всички преминават. Качествена - определя наличието и количественото - помага при потвърждаването на заключението "вирус на хепатита", прогнозата за хода на заболяването и определянето на хода на лечението. Колко ефективна е терапията, разгледайте броя на РНК преди и по време на лечението. Също така се използва за определяне на дозировката на лекарства.

    свидетелство

    По правило се произвежда преди началото на възстановяването. Основните индикации могат да бъдат:

    • определянето на вирусното натоварване и контрола на антивирусната терапия;
    • качественият PCR откри хепатит С антитела;
    • откриване на остър и хроничен хепатит С;
    • наличието на смесен хепатит;
    • при планиране на лечението;
    • ако качественото изследване все още открие наличието на болестта след дванадесетата седмица от лечението.

    Също така вижте какъв вирусен товар за хепатит: ниската терапия е успешна; повишено - лечението не е ефективно и трябва да се промени.

    Какво се прави на различни стадии на заболяването?

    На различни фази на болестта проучването се провежда, за да се направи преглед на ползите от лечението и да се планира продължителността на по-нататъшното му прилагане. С добрите отговори на терапията, тя се съкращава. В противен случай, при бавно изтегляне на вируса, продължителността на лечението се удължава. PCR за хепатит се извършва на 1,4, 12, 24 седмици от лечението. Когато индикаторите не падат след 12 седмици, те заключават, че терапията не е подходяща за този организъм. Този анализ се използва, за да се установи колко активна е инфекцията и колко е вероятно тя да бъде предадена. Например, по време на бременност, съществува риск от заразяване на бебе. След терапията се установява рискът от рецидив.

    препис

    След проучването анализът може да бъде дешифриран не с числа, а с думите: "под обхвата на измерване" и "неоткрит". Количественият PCR е по-чувствителен към качеството. Заключението "не е намерено" може да се каже, че инфекцията не е намерена. "Под обхвата на измерване" - тестът не е открит от вируса, но е в малка степен. В тази ситуация направете второ проучване.

    Вирусно натоварване - определяне на броя на инфекциозната РНК в установения обем кръв (количествено 1 ml = 1 кубичен сантиметър). Той се формулира в международни измервания ME / ml. Индивидуалните лаборатории посочват копия / ml. Дешифриране на превръщането на компонентите в международни ценности, различни системи за тестване могат по свой начин. Таблица 1. Декодиране на количествения анализ на вирусната РНК

    Нормата на количествен анализ за хепатит С

    Когато човек е здрав, норма е - "не е намерен". Засегнати хора норма ще намали дозата на резултати вирус в логаритмична единица, която проявява се намали броя на нули в анализа от едно (например, 1 х 106 IU / мл до 1 х 105 IU / мл). Рамки вирус концентрационен обхват, който определя термосайклера са в границите 102 1,8 * - 2.4 * 107 IU / мл. Тълкуването на резултата:

    • ниска концентрация - от 600 IU / ml до 3 * 104 IU / ml;
    • средно - от 3 * 104 IU / ml до 8 * 105 IU / ml;
    • Високо над 8 * 105 IU / ml.

    отклонения

    Ако резултатите от анализите се променят извън нормата, това може да означава връщане на болестта и възпроизвеждане на вируса. Някои фактори могат да повлияят върху получаването на ненадежден резултат, например замърсяване на пробите; наличието в кръвта на хепарин и вещества, които забавят действието на компонентите на PCR; лабораторни грешки; несъответствие с теста.

    Също така, резултатът от няколко лаборатории може да варира, може би имаше различна методология за изследване. За да се знае колко е засегнат черният дроб и опасността от заболяването, не е достатъчно да се определи количествено хепатитният PCR. Освен това се извършват биохимични процедури и биопсия.

    При планиране на лечението вирусът е генотипен. Поради факта, че хепатит С може да се промени, има няколко групи. За различните видове лечение може да се различават. Има ситуации, при които има няколко вида, но анализът намира един, който преобладава. След това тестът ще бъде повторен.

    Предимствата на метода

    Техниката на PCR дава възможност да се даде становище и да се предпише правилното лечение. Предимства на методологията:

    • Скоростта на резултатите не изисква разграничаване и култивиране на видовете патоген. Автоматизирането на процеса ви позволява да обработвате и изучавате материала с резултат в рамките на 4-5 часа.
    • Директността на определяне на патогена - намирането на специална част от ДНК, директно показва наличието на болестта. Например, ELISA - открива белтъчни маркери (продукти от живота на бактериите), които не осигуряват точно потвърждение за наличието на болестта.
    • Специфичност - изследва се вещество, което е специфично за определен патоген, което изключва реакцията към фалшиви ко-реактивни агенти.
    • Чувствителност - може да открие най-малък брой вируси.
    • Универсалността - се основава на откриването на фрагменти от ДНК или РНК на специфични организми. Това прави възможно извършването на диагностика за всички агенти от един биоматериал, ако други методи са безсилни.
    • Тя разкрива не само очевидни, но и скрити инфекции - тя е ефективна за изучаване на агенти на трудно отглеждани, не култивирани, устойчиви.
    • https://www.youtube.com/watch?v=lBi-d6jAKxQ

    Чрез това изследване всеки човек може да бъде диагностициран с диагноза липса на заболяването. Но за надеждни факти трябва да следвате инструкциите. PCR се използва в различни отрасли: forensics, за тестване на бащинство, за диагностициране на различни вируси, за откриване на алергия към лекарства, генно клониране, мутагенеза, ДНК секвениране.

    Кога е определен тестът за вирусно натоварване?

    Това изследване се определя от лекар в случай на положителен отговор при диагностициране на хепатит С. Като правило, то се назначава едновременно с анализа за определяне на генотипа на хепатит С. Това, което прави декодирането на количествен анализ за хепатит С? На първо място, този анализ показва как пациентът е заразен и следователно заразен. Количественото определяне на вируса в кръвта може също така да определи колко ефективна е терапевтичната схема. Лекарите го предписват след 4, 12 и 24 седмици лечение. Намаляването на нивото на вирусното натоварване предполага, че терапията е избрана правилно. Също така, анализът се прилага след 24 седмици след края на терапията.

    Проучванията показват, че степента на вирусното натоварване не винаги повлиява скоростта на развитие на патологичните процеси в черния дроб. Случаите на носителя на вируса показват, че самият човек не може да бъде заразен с хепатит С, а да бъде източник на инфекция на други хора. Освен това, превозвачите по всяко време могат да се разболеят. Вирусът на хепатит С се активира с намаляване на имунитета, например, след като страда от остра респираторна вирусна инфекция, грип, тежък стрес или хипотермия.

    Хепатит С начини на предаване

    Заразяването с хепатит С може:

    • през кръвта. Възможна инфекция с трансфузия на заразена кръв, по време на операции и манипулации с кръв, зъболечение, отстраняване на бенки и брадавици, ако има грешки в стерилизиращите инструменти;
    • в салони за красота при извършване на татуировка, пиърсинг, оформяне на маникюр и педикюр, козметично почистване на лицето и др.;
    • от майка на дете по време на раждане (5%);
    • по време на незащитения секс с инфектирано лице;
    • по време на инжектиране на наркотици не с спринцовки за еднократна употреба;
    • когато първа помощ се дава на лице, заразено с вирус, ако не се спазват мерките за безопасност

    За разлика от други хепатити, методите за предаване на хепатит С се свързват главно с кръвта. Невъзможно е да се получи хепатит С по домовете! Нито ръцете, нито обикновените целувки (несексуалната природа) и комуникацията, нито използването на домакински предмети не могат да предават хепатит С! Не използвайте само маникюр и аксесоари за бръснене от човек, който страда от хепатит С! При предоставяне на първа помощ при наранявания, пациентите с хепатит С трябва винаги да носят ръкавици! Вирусът умира при кипене след няколко минути, а при миене при 60 ° C - след тридесет минути. Замразяването не убива вируса. Ударен ефект върху вирусната UV радиация. След 16 часа вирусът умира при стайна температура!

    PCR диагностика

    PCR е най-честият и точен метод за определяне на вируса и неговите количествени възможности. Методът е в състояние да открива вируси в различни форми и да диагностицира малко известни заболявания.

    PCR анализ (полимеразна верижна реакция) се извършва чрез вземане на кръвни проби и определяне на вирусна РНК в него.

    Специфични ензими се добавят към кръвните проби и се определят в специален реактор. Има клониране на клетки.

    Първо, една клетка е разделена на две копия, след което всяко от копията е разделено на още две. Така, след синтеза на копия, се появяват стотици ДНК клетки.

    ДНК може да бъде сравнена с база данни с информация за различни патогени и да се идентифицира инфекцията в ранните стадии на заболяването.

    Предимства на метода на PCR:

    • много методи за диагностициране разкриват само присъствието на вируса чрез изолиране в кръвните продукти на жизненоважна активност на инфекциозни микроорганизми. Методът на PCR директно показва причинителя на инфекцията;
    • Специфичността на PCR е, че установен е уникален ДНК фрагмент в изследваната кръвна проба. Това елиминира шанса за фалшив резултат;
    • PCR може да открива дори единични инфекциозни клетки и да диагностицира няколко патогени в една кръвна проба.

    Качествен анализ

    Помага да се открие вирусът в кръвта. Ако резултатът е положителен, трябва да продължите изследването и да проведете количествен анализ, който ще определи етапа на заболяването и ще даде възможност на лекарите да планират най-благоприятните тактики за лечение. При извършването на този анализ се допускат само две изводи:

    • "Установена". Доказателство за наличието на вируса в кръвта. Подобен резултат се счита за положителен. Кръвта РНК вече е открита, която вече е започнала да се развива, заразява здравите клетки и удря черния дроб.
    • "Не е открит". Той казва, че в кръвната проба няма РНК на хепатит С. Съществуват и случаи, при които концентрацията на вируса в тестовата проба е незначителна и не попада в чувствителността на анализа. Струва си да се отбележи, че анализът разкрива инфекцията на десетия ден след инфекцията, което прави възможно идентифицирането на вируса преди значимите външни прояви.

    Количествен анализ

    Открива концентрацията на генетичния материал на вируса в определен обем кръв. Това не само ви позволява да определите тежестта на заболяването, но също така ви позволява да видите пълната клинична картина на заболяването (включително лечение). В резултат на този анализ могат да бъдат само 3 извода:

    Резултатът е "Положителен". Резултатът от числения индекс отразява вирусното натоварване. Концентрацията на вируса определя количеството вирус в 1 милилитър, което е равно на 1 кубичен сантиметър кръв. Единиците на този анализ са ME / ml (международно приети единици на милилитър). Ако концентрацията на вирусните частици е по-малка от 8x10 000 IU / ml, тогава лечението е ефективно, ако напротив, е необходимо да се променят тактиките на лечение.

    Ако вирусният товар по време на първите седмици от лечението спадне до 60%, тогава ефективността на лечението е висока. Ниското ниво е равно на 400 000 IU / ml, а високото ниво е от 1 000 000 IU / ml. Вирусният товар определя степента на заболяването и възможността за предаването му. При високо ниво на вирусна клетъчна концентрация в кръвта, рискът от предаване на заболяването или вертикално, или сексуално е доста голям.

    • Резултатът е "Невалиден". Този резултат означава, че е открит качествен анализ на вируса в тялото, но количественият анализ не може да определи концентрацията му в кръвта. Това се случва, когато количеството на РНК частиците на вируса в кръвта е под диапазона на откриване.
    • Резултатът "Не е открит". Тълкуването на анализа означава липсата на РНК клетки от хепатит С в кръвна проба.

    Количественият анализ на КНР се извършва на всички етапи от заболяването. За да се определи оптималното лечение, тестовете се извършват на датите: (4-та, 12-та, 16-та и 24-та седмица). Ако резултатите показват намаляване на вирусния товар, лечението може да се счита за ефективно. След завършване на лечението количественият анализ се извършва, за да се открие повторение, т.е. да се открие вирусът след намаляване на неговата активност до минимум.

    01 Принципи за диагностициране на HCV

    Серологичната диагностика на хепатит С се основава на откриването на уникални маркери на човешка кръвна плазма проби от вируса на хепатит С: антитела срещу антигени на HCV, принадлежащи към имуноглобулин G и М (анти-HCV-IgG и анти-HCV-IgM), и нуклеинова патоген киселина (РНК HCV).

    Принципът на този метод се базира на откритието на ДНК фрагменти с материала (РНК) на различни биологични обекти, тяхната селективна синтеза и по-нататъшно усилване на откриване на реакционните продукти на тези фрагменти.

    Количествените модификации на PCR дават представа за HB, което е от решаващо значение за прогнозата и контрола на терапията за вирусен хепатит С.

    02 Изчисляване на вирусното натоварване за вирусен хепатит С

    Обикновено, HCV РНК може да бъде открита в кръвта през първата седмица след заразяването, преди появата на анти-HCV (анти-HCV), което може да не бъде открито през първите 8-12 седмици. Двата маркера за HCV инфекция могат да бъдат открити в кръвта в различни комбинации, което изисква правилна клинична интерпретация.

    Следователно, за да се формулира крайната диагноза, се препоръчва, особено когато се открие един от двата HCV маркера, да се тества кръвната проба за анти-HCV и HCV РНК.

    В хода на изследването се извършва откриване и преброяване на броя копия на HCV РНК чрез PCR в реално време.

    В клиничната практика най-съвършеният метод за PCR диагностика е REAL-TIME PCR, който изключва замърсяването на пробите и дава мнение за наличието и количеството на HCV РНК две седмици след предполагаемата инфекция. Тази техника, наред с други неща, определя генотипа на вирус с вирусен товар за едно изследване. Клиничната специфичност на теста е 100%. Стандартният обхват на тестовите стойности е от 15 до 100 милиона IU / ml. Генотипите на вирус 1-6 (1, 2, 3, 4, 5, 6) се разкриват. Прагът на положителния тест, когато РНК на вируса може да бъде открит, е 15 IU / ml. Основното предимство на метода на PCR е много високата чувствителност на анализа - до 1 копие от геномната ДНК на инфекциозния агент в тестовата проба при вложената модификация на PCR.

    PCR е модерен, изключително чувствителен метод. Но нейното достойнство - висока чувствителност - в същото време е неговата уязвимост, т.е. води до неверни резултати дори когато анализът се извършва от висококвалифицирани специалисти в добре оборудвани лаборатории. Резултатите от проучванията в различни лаборатории често не съвпадат, което показва необходимостта от стандартизиране на диагностичните системи за PCR диагностика и повишено внимание към провеждането на този тип изследвания. Високата цена, продължителността на анализа, сложността на метода и несъответствието между резултатите, получени в различните лаборатории, ограничават използването на PCR в широката практика.

    Резултатите от изследването са показани във форма с таблица показваща установеното ниво на РНК на вируса (брой копия или концентрация в IU / ml). Други математически символи могат да бъдат използвани за изразяване на ME / ml стойност, например 1,9 * 10 ^ 5 (1,9 за 10 до 5 градуса).

    03 Указания за изследвания

    Основните индикации за определяне на вирусния товар при вирусен хепатит С са:

    • лабораторно потвърдено качествено присъствие на РНК в кръвния серум;
    • Наличието на лекаря, отговарящ за избора на режим за употреба на антивирусни препарати;
    • Необходимостта от точна оценка на ефективността на лечението.

    Проучването не изисква специална подготовка на пациента.

    04 Тълкуване на резултатите

    Обикновено, при здрав човек няма РНК на патогена, т.е. BH е нула. BH се изразява в международни единици на ml. Остават се големи BH (> 400,000 IU / mL) и малък ВН (100,000,000 IU / mL)

    За да се следи ефективността на антивирусната терапия, трябва да се използва PCR анализ в реално време с минимално ниво на откриване от 15 IU / ml. За да се прави разлика между ниска HH и висока, нивото на вирусната РНК е 500 000 IU / ml.

    Нивото на вирусното натоварване се наблюдава както при остър, така и при хроничен хепатит С. Нивото на вирусното натоварване се фиксира по време на лечението, след завършването му и 24 седмици след лечението.

    При бременни жени този показател е фиксиран за диагностични цели, тъй като антивирусната терапия по време на бременност не се извършва.

    Данните за вирусни нива на натоварване се използват за подбор и мониторинг на антивирусната терапия, но в никакъв случай не дават представа за изхода на заболяването, особено в случаите на хроничен хепатит С с нормална чернодробна функция.

    При клинично проследяване пациентите веднъж годишно качествено определят HCV РНК в кръвта. Ако качественият резултат е положителен, тогава се извършва количествен анализ с дефиницията на вирусното натоварване.

    05 Заключение

    Досега са използвани различни методи за диагностициране на HCV, сред които количествено определяне на нивото на вирусното натоварване е от ключово значение за успешното лечение на пациента. Предимствата на този метод са висока надеждност, чувствителност и клинична специфичност. В допълнение, нивото на вирусното натоварване е много ясен показател за ефективността на лечението с антивирусни лекарства, както в монотерапия, така и в комбинации.

    Но въз основа на нивото на вирусното натоварване, в никакъв случай не можем да преценим хода и резултата от заболяването. Следователно, този показател е информативен за лекуващия лекар само в комбинация с други данни - резултатите от фиброскопиране и биопсия с микроскопия на чернодробните клетки. По този начин изчисляването на нивото на вирусното натоварване в никакъв случай не замества, а само допълва съществуващите диагностични методи, използвани в клиничната практика.

    Нивото на вирусното натоварване е най-надеждният индикатор, който позволява да се установи наличието на вируса на пациента надеждно и да се контролира терапията.


    Статии Хепатит