Антиген срещу ХИВ: какво представлява тя, каква роля играе диагностиката?

Share Tweet Pin it

Диагнозата на вируса на имунната недостатъчност се извършва по различни начини. Най-популярната наскоро обаче получи ултра-чувствителна тестова система. С тяхна помощ е възможно тази болест да се идентифицира на най-ранните етапи. За целта се използва HIV антиген, чието присъствие в организма е гарантирано, че показва неприятна и опасна диагноза. Няколко различни проучвания се използват за неговото откриване.

Защо е най-надеждният индикатор за наличието на вируса на имунната недостатъчност?

Тестът за вируса на имунната недостатъчност в обществените лечебни заведения е безплатен. Но се произвежда на два етапа в случай, че е необходимо. Първоначално ХИВ не се тества за ХИВ. Първият анализ за наличието или отсъствието на това заболяване е насочен към откриване на антитела. Това е тест за ELISA. Имуноензимен анализ ви позволява да идентифицирате хора, които не са гарантирани, че са заразени с вируса на имунната недостатъчност (в случай, че тестът е извършен съгласно всички правила).

И условно заразени. Защо условно? Факт е, че антителата срещу HIV 1,2, за разлика от АХ на този вирус, се секретират в организма и по други причини. За какво точно говорим. На първо място, това е възможно при заболявания на имунната система. В случай на проблеми с тази система жизненоважен орган, като защита произвежда антитела, които се определят от имунологичен тест, както и тези, които се появяват в тази опасна болест. Ако резултатът от ELISA се окаже положителен, пациентът се насочва към допълнително проучване, което се основава на откриването на реакцията на AH-AT от 1,2 тип. В клиниките най-често се използва имунно блотиране. Това е най-честият вид анализ за откриване на вируса на имунната недостатъчност. С неговата помощ антигенът и антителата срещу HIV 1 и 2 не само се откриват, но и се тестват за силата на реакцията.

Какво представлява р24 антигена за HIV?

Преди да говорим за това какви методи могат да бъдат открити, трябва да се обясни какво е той. Учените са установили, че хипертония, която се поставя върху формата на анализи и лабораторни маркировка p24 капсид е ретровирус. С прости думи, това е протеин на вируса на имунната недостатъчност. Определянето на HIV антиген е невъзможно без откриване на антитела от първия и втория тип. В края на краищата АХ са силно свързани с антитела. Те се формират в тялото като имунен отговор към появата на антитела, които, от своя страна, са един вид "нашественици", насочени към унищожаване на имунната система и производството на опасни биологични материали.

АТ и АГ на HIV от 1 и 2 вида се разкриват в реакцията помежду си. Първият изпълнява ролята на чужди молекули в човешкото тяло. Последният служи като вид разработчик на протеини или полизахариди. В случая на вируса на имунната недостатъчност AH причинява имунен отговор. Следователно, в медицината и науката, свързани с изследването на това заболяване, те се класифицират като имуногени.

P24 антиген на HIV 1 и тип 2 се откриват само чрез изчерпателно изследване на биологичен материал. Най-често се използва венозна кръв за анализ. В някои случаи това е подходящо за сперматозоиди или секреторни течности, секретирани от женските генитални органи. Комбинираният ХИВ антиген анализ се извършва по три известни начина. За какво конкретни проучвания говорим? Това е имунно блотиране, комбо тест (hiv combo HIV) и имунохемилуминесцентен анализ. Всеки от тях трябва да бъде обсъждан отделно.

Имунно блотиране: антитела и антигени към HIV 1 и 2

Както вече беше споменато по-горе, имунното блотиране е един от най-честите тестове, които откриват антигена на HIV. Как се произвежда? Първоначално пациентът взема кръв от вената. Изследването се извършва на празен стомах. Тридесет и четиридесет минути преди това пациентът не се препоръчва да пуши. Същността на изследването е, че ако човек има вирус на имунната недостатъчност тип 1 или тип 2, реакцията антиген-антитяло е стабилна и неразтворима. Биологичният материал на субекта първо се смила в специален реагент, след това се поставя върху лента, която като правило е блистер с полистиренови клетки. Чрез добавяне на специални реактиви, лаборант, първите проверки, за да се види дали се появи подобна реакция, след това да използвате многократни измивания кръв се правят изводи за това как той е устойчив. Това ни позволява да разберем дали в организма има вирус на имунната недостатъчност, който в бъдеще е най-важният фактор в диагнозата.

Изследването на ХИВ на AG-AT, получено чрез имунно блотиране, се препоръчва да бъде дадено не по-рано от четири до пет седмици след предполагаемата инфекция. Въпреки факта, че този тест е система от четвърто поколение, той не е супер чувствителен и има грешка от няколко процента (две до три).

Свръхчувствителен анализ: hiv duo HIV (комбо) антитела 1, 2 вида

Комбинацията от HIV тест (hiv) ag-ab (AG-AT), за разлика от имунното блотиране, е свръхчувствителна. Специалисти в областта на медицината твърдят, че употребата му се препоръчва вече две седмици след предполагаемата инфекция. Целта е изследването на специфични антитела, които са вид имунен отговор на човешкото тяло на интервенционалист, като вируса на имунната недостатъчност, както и АН р24. ХИВ-дуото ХИВ антитела от тип 1 и 2 са насочени и към откриване на антитела срещу това опасно заболяване. С негова помощ е възможно не само да се открият в кръвта, но и да се определи вида на заболяването.

Тестът за комбиниран антиген на HIV се комбинира. С негова помощ реакцията антиген-антитела също се тества, което показва наличието на ужасно заболяване в тялото.

Имунохемилуминесцентен анализ: hiv 1,2 combo HIV-AT-AG IHLA

Тестът за HIV за HIV също е свръхчувствителен. В основата на такова разследване е един вид реакция на AG-AT. Специфичността на метода е около деветдесет и два процента, докато надеждността му е от деветдесет и осем до деветдесет и девет. От това може да се заключи, че има грешка в такъв анализ, но е сравнително малък. И ако е необходимо, лесно се припокрива с многократни тестове. Този анализ се използва след две или три седмици след предполагаемата инфекция.

Този комбо тест за ХИВ е насочен към изследване на венозна кръв, в случай на проверка за наличие на вирус на имунната недостатъчност в тялото. При идентифициране на други заболявания и патологии се използва урина или секреторна течност, която се освобождава от гениталните органи. AT и AG към вируса на имунната недостатъчност с IHL също се тестват за реакцията. За целта се използват специални реактиви и лента с клетки. Изследванията, проведени на няколко етапа, позволяват бързо и точно да се установи диагнозата или да се опровергае.

Всички гореописани методи за диагностициране на вируса на имунната недостатъчност чрез стабилна АТ-АГ реакция са ефективни. Те се различават само по отношение на допустимите срокове на изследването. Лекарят трябва да реши кой метод трябва да се използва.

P24 антиген в серума

Ar p24 в серума обикновено липсва.

Ар р24 е протеин на HIV нуклеотидната стена. Степента на първичните прояви след заразяване с ХИВ е следствие от възникването на репликативен процес. Аг р24 появява в кръвоносните 2 седмици след инфекцията и могат да бъдат открити чрез ELISA в период от 2 до 8 седмици. След 2 месеца, считано от началото на инфекцията Ag p24 изчезва от кръвта. По-късно в клиничното протичане на ХИВ инфекцията отбележат втората покачването на белтъка р24 съдържание на кръв. Той попада в периода на формиране на СПИН. Съществуващите тестови системи ELISA за откриване на Ag p24 се използват за ранно откриване на ХИВ при донори на кръв и деца, определяне на прогнозата за хода на заболяването и наблюдение на терапията. метод ELISA има висока аналитична чувствителност, което позволява откриване Аг р24 на HIV-1 в кръвния серум при концентрации от 5-10 пг / мл и по-малко от 0.5 нг / мл HIV-2, и специфичност. Все пак трябва да се отбележи, че съдържанието на Ag p24 в кръвта е предмет на индивидуални вариации, което означава, че само 20-30% от пациентите могат да бъдат идентифицирани чрез това изследване в ранния период след инфекция.

Антитела срещу p24 Ag класове IgM и IgG в кръвта се появяват, като се започне от седмицата на 2-рия, достигайки връх в рамките на 2-4 седмици и се държат на ниво, различно време - на IgM антитела в продължение на няколко месеца, изчезва в рамките на една година от инфекция, и Ig IgG могат да се запазят в продължение на години.

Появата на класове от АТ на различни стадии на ХИВ инфекция е представена на Фиг.

Фиг. Появата на класове от АТ в различни стадии на ХИВ инфекция

Фиг. Появата на класове от АТ в различни стадии на ХИВ инфекция

Методи за диагностициране на HIV инфекция

Понастоящем новите диагностични технологии позволяват да се разкрият етиологичните и патогенетични причини за много заболявания и радикално да повлияят на резултатите от лечението. Може би най-впечатляващите резултати от въвеждането на тези технологии в клиничната практика са постигнати в областта на имунологията и диагностиката на инфекциозни заболявания.

Тестовата система въз основа на ензимен имуноанализ и анализ immunohemilyuminestsentnogo разкрие на различните класове антитела, което значително подобрява клиничните информация за методите, аналитична чувствителност и специфичност за диагностика на инфекциозни заболявания. Трябва да се отбележи, че най-значителните постижения в диагностицирането на инфекции, свързани с въвеждането в лабораторна практика на метода на полимеразната верижна реакция, която се счита за "златен стандарт" за диагностициране и оценка на ефективността на лечението на някои инфекциозни заболявания.

серум, кръвна плазма, изстъргва, биопсия, плеврален или гръбначно-мозъчната течност (CSF) за изследване на различен биологичен материал може да се използва. На първо място, лабораторно диагностициране на инфекции техники, насочени към откриване на заболявания като вирусен хепатит В, С, D, цитомегаловирусна инфекция, инфекции, инфекции, предавани по полов път (gonorrheal, хламидия, микоплазма, Ureaplasma), туберкулоза, ХИВ и други.

ХИВ инфекция - заболяване, причинено от вируса на човешка имунна недостатъчност (HIV), дълго устойчиви в лимфоцити, макрофаги, клетки на нервната тъкан, което води развива бавно прогресивно увреждане на имунната система и нервната система на тялото, се проявява с вторични инфекции, тумори, субакутен енцефалит и други патологични промени.

Инфекциозни агенти - човешкия имунодефицитен вирус тип 1 и 2 (HIV-1, HIV-2) - принадлежат към семейството на ретровируси, подсемейство на бавно вируси. Вирионите са сферични частици с диаметър 100-140 nm. Вирусната частица има външна фосфолипидна обвивка, включваща гликопротеини (структурни протеини) с определена молекулна маса, измерена в килодалтони. В HIV-1 е gpl60, gpl20, gp41. Вътрешната обвивка на вируса, покриване на сърцевината, както е представено от протеини с известна молекулна маса - р17, р24, р55 (HIV-2 включва gpl40, gpl05, gp36, р16, р25, р55).

Съставът на HIV генома включва РНК и ензимна обратна транскриптаза (ревертаза). За да се свърже генома на ретровируса с генома на клетката-гостоприемник, синтеза на ДНК върху матрицата на вирусната РНК се осъществява първо с помощта на ревертаза. След това провирусната ДНК се вмъква в генома на клетката гостоприемник. ХИВ има изразена антигенна вариабилност значително по-висока от тази на грипния вирус.

В човешкото тяло основната цел на ХИВ е Т-лимфоцитите, носещи най-голям брой CD4 рецептори на повърхността. След влизането на HIV в клетката чрез обратната транскриптаза шарка синтезира РНК вирус ДНК, която е интегрирана в генетичния апарат на клетката гостоприемник (CD4 лимфоцити) и остава там за живот в състояние на провирус. В допълнение към Т-лимфоцитите, макрофагите, В-лимфоцитите, клетките на невроглита, чревната лигавица и някои други клетки са засегнати. Причината за намаляване на броя на Т-лимфоцити (CD4 клетки) е не само директно цитопатичен ефект на вируса, но и да им сливане с незаразени клетки. Заедно с лезии на Т-лимфоцити при пациенти с HIV инфекция се отбележи поликлонално активиране на В-лимфоцити с увеличаване на синтеза на всички класове имуноглобулини, особено IgG и IgA, и последващото изчерпване на картата на имунната система. Нарушената регулация на имунните процеси също проявява с повишено ниво на α-интерферон, β2-микроглобулин, намалява IL-2 нива. Като резултат от дисфункция на имунната система, особено за намаляване на броя на Т-лимфоцити (CD4) до 400 клетки на 1 мл кръв или по-малко, има условия за неконтролирано репликацията на ХИВ със значително увеличение на броя на вириони в различни среди на тялото. В резултат на поражението на много части от имунната система, човек, заразен с ХИВ, става уязвим за инфекциозни агенти.

На фона на нарастващата имунодепресия се развиват тежки прогресивни заболявания, които не се срещат при лица с нормално функционираща имунна система. Това са болести, които Световната здравна организация (СЗО) определи като индикатор за СПИН или СПИН-индикаторни заболявания.

СПИН-индикаторни заболявания

Първата група - болести, присъщи единствено на тежка имунна недостатъчност (CD4 ниво 74,100 копия / ml почти всички пациенти развиват клинична картина на СПИН (Senior D., Holden E., 1996).

Вероятност от развитие на СПИН в 10,8 пъти по-високи при пациенти с HIV-1 съдържание в кръвта> 10,000 копия / мл в сравнение с тези с кръвта на HIV-1 съдържание на 20 000 копия / мл (PCR). Оценката на резултатите от антиретровирусната терапия при хора, заразени с ХИВ, се провежда, за да се намали нивото на ХИВ HIV РНК в серума.

При ефективно лечение нивото на виремия трябва да се понижи 10 пъти през първите 8 седмици и да бъде под границата на чувствителност на метода (PCR) (

Таблица на транскрипта на резултатите от теста за ХИВ

Особено внимание се отделя на диагностицирането на вируса на HIV (човешки имунодефицитен вирус) при хора. Откриването на болестта на ранен етап ще помогне да започне курса на лечение по-рано и това значително ще повлияе на продължителността на живота на пациента.

След като се направи теста за ХИВ, тълкуването на резултатите обикновено е положително или отрицателно. В този случай има първична диагноза и вторична диагноза. На първо място - лицето проверка чрез IFA. При необходимост се прави повторен кръвен тест за ХИВ. Какво означава положителният и отрицателният резултат? Как се прави транскриптът на теста за ХИВ? Защо човек, който не е наркоман и алкохолик, има редовен сексуален партньор, препис анализ имунодефицитен вирус е положителна, но съмнителни резултати?

За ХИВ

Причиняващите агенти на болестта са от 1-ви и 2-ри тип. За дълъг период от време, присъствието им в човек остава незабелязано, тогава имунитетът е преди всичко засегнат, а след това и други човешки системи.

Основният метод за лабораторна диагностика на вируса на имунната недостатъчност разкрива антитела срещу ХИВ. Имуноензимен анализ (ELISA) е основата на метода, той е чувствителен (99.5% и по-висок) и специфичен (99.8% и по-висок). Освен това, когато се диагностицира HIV с EIA, се определя антиген р24.

Всяка тестова система има различни индикатори, във връзка с които те определят различните протеинови структури на пликовете на вируса. ХИВ патогените са от два подтипа: първи и втори, или HIV-1 и HIV-2. Вирусните частици изглеждат като сферична форма, която има външна фосфолипидна мембрана. За първия подтип има следната молекулна маса: gp120, gp41, gp160. Вторият подтип съдържа gp105, gp36, gp140. За вътрешната обвивка на вируса е известно и молекулното тегло. За първия подтип това е p55, p17, p24. За вторите - p16, p25, p55.

За всяка система за тестване, за да се определи вируса, има три основни групи протеини.

По принцип резултатът от ELISA може да бъде:

  • отрицателно;
  • фалшиво положително;
  • фалшиви отрицателни
  • съмнителна или несигурна.

Методите за диагностика идентифицират антигени, антитела.

За нормалния резултат

Норм - какво означава това? Когато тестът за ХИВ е отрицателен, той се счита за нормален.

1. Последното поколение системи за тестване на ELISA може да определи наличието на антитела срещу ХИВ и протеинови частици. Ако анализът е нормален, тогава кръвта не открива антитела и протеинови частици на патогена. Но е точна да се каже, че човек е здрав въз основа на това може да бъде, ако преди да го предаде, няма риск от инфекция в продължение на 3 месеца. В противен случай, отново след известно време, трябва да повторите теста.

Има случаи, при които ХИВ е открит само след 6 месеца. Следователно, ако резултатът е отрицателен и има контакт с ХИВ-инфектирания пациент, за надеждност е необходимо да се повторят тестовете след три, четири и шест месеца. Случва се, че ELISA даде отрицателен резултат и човек ясно има подозрение за наличие на признаци на ХИВ, след което се препоръчва да се направи отново теста. Възможен е погрешен резултат поради ранното време на анализа или поради човешкия фактор.

2. Ако резултатът е отрицателен с имуноблот, тогава това е най-надеждният анализ.

Ако човек има вирус на имунната недостатъчност и резултатът е отрицателен, най-вероятно това е медицинска грешка, която може да възникне на всеки етап от теста. Ако резултатът от имуноблот за три и шест месеца е отрицателен, тогава няма какво да се притеснявате, това показва норма. И само след отрицателен отговор от имуноблока ще бъде издаден сертификат, че теста за ХИВ е отрицателен.

3. Изследване на PCR при възрастни, когато диагностицирането на вируса на имунната недостатъчност се използва изключително рядко и този метод се използва за новородени деца.

Нормата тук също се счита за отрицателен резултат.

4. Според социологически изследвания, много хора използват бързите тестове за ХИВ. При отрицателна лента хората се успокояват и отказват да отидат в медицинско помещение, дори ако има всички признаци на HIV инфекция. Но трябва да знаете, че точността на изричното тестване е осемдесет и пет процента. Освен това, у дома, можете да го извършите погрешно, или условията за съхранението му да бъдат нарушени. Все още има голяма вероятност резултатът да е неправилен. Дори 8 часа преди тестването минералната алкална вода ще повлияе на резултата от теста. Следователно, фактът, че вирусът на човешката имунна недостатъчност отсъства в дадено лице въз основа на изричен тест, дори и да е отрицателен, в никакъв случай не е вярно.

Обяснение на анализа

След провеждането на теста, хората често се чудят как да разчитат резултатите от изследванията, какво да правят, ако се получи положителен резултат за ХИВ.

1. Ако ELISA показа наличието на всички или почти всички антитела към антигени съгласно тази система за тестване, това показва положителен тест за HIV. Ако отговорът след втория имунен анализ на серумния ензим е положителен, трябва да се извърши имуноблот. Дешифрирането на резултатите ще бъде по-правилно. Ако ензимният имуноанализ даде положителен резултат, следващият имуноблот анализ показа и наличието на ХИВ, след което се поставя крайният резултат. Когато анализите се дешифрират, трябва да се знае, че се определя положителен тест за HIV:

  • от 60% до 65% 28 дни след заразяването;
  • при 80% - за 42 дни;
  • в 90% - за 56 дни;
  • при 95% за 84 дни.

Ако отговорът на ХИВ е положителен, тогава това ще означава, че се откриват антитела срещу вируса. За да избегнете фалшив положителен отговор, трябва да тествате отново, за предпочитане два пъти. Ако антитела имунодефицит идентифицирани при депозиране два анализа на две или връщане на 3 анализи в две от тях, се счита, че положителен резултат.

Антиген р24 може да бъде открит в кръвта след 14 дни от деня на инфекцията. Използвайки метода на ензимния имуноанализ, този антиген се открива от 14 до 56 дни. След 60 дни той вече не е в кръвта. Само когато тялото формира СПИН, отново има растеж на този протеин р24 в кръвта. Следователно, системата за изпитване свързан имуносорбентен анализ използва за откриване на HIV инфекция в първите няколко дни, или така, за да се определи как се появява болестта и наблюдение на процеса на лечение. Висока аналитична чувствителност имуноанализ открива р24 антиген в биологичния материал в първия HIV подтип при концентрация от 5 до 10 пг / мл, с втори HIV подтип от 0.5 нг / мл и по-малко.

2. Под съмнителни резултати ELISA означаваше, че диагнозата на грешка някъде, обикновено нещо объркан медицински персонал или лице, има признаци на инфекция, а резултатът е отрицателен, което е подозрително, човекът, изпратени за повторен анализ на промяната.

3. Фалшивият положителен резултат е резултатът, когато са направени кръвните изследвания при следните състояния на пациента:

  • бременност;
  • ако човек има хормонален произход;
  • с продължителна имунодепресия.

Как да дешифрираме анализа в този случай? Получен е фалшив положителен резултат, ако се открие поне един протеин.

Поради факта, че р24 антигенът е силно зависим от индивидуалните вариации, след това при този метод в първия период на инфекция се откриват от 20% до 30% от пациентите.

На параметрите след полимеразната верижна реакция

Използвайки този метод, ХИВ РНК и ДНК се откриват почти веднага след инфекцията. Но няма окончателна диагноза, трябва да се потвърди и с други методи. "Помогнете ми да дешифрирам резултатите от PCR" - Доста често можете да чуете такова искане. Какво е написано в този случай, ако се открие вирус на имунната недостатъчност? В отговор на резултата от анализа, извършен с PCR, се посочва броят на копията на РНК в милилитри кръв. Таблицата по-долу показва резултата в зависимост от количествените характеристики в кръвта.

Какво означава: имате (не открити) антитела срещу ХИВ

Едно от най-надеждните проучвания за ХИВ е ELISA (ензимен имуноанализ). За да се открие наличието на вируса на имунната недостатъчност в кръвта, се провежда тестването за антитела. Трябва ли да се притеснявам, ако не бъдат намерени? Какво означава положителното ELISA?

Какви са антителата срещу ХИВ в кръвта

Ако патогенният вирус навлезе в човешкото тяло, имунната система започва да произвежда антитела срещу ХИВ. Когато такива протеинови връзки се намират в тестовата кръвна проба, това е алармен сигнал. Има голяма вероятност човек да е заразен с опасен вирус. Откритият HIV антиген р24 показва, че наскоро настъпи инфекция с вируса на имунната недостатъчност. Антигенът е органично вещество. Количеството в кръвта намалява, когато тялото произвежда антитела. Броят антитела на единица кръв ви позволява да предскажете развитието на заболяването.

Друга важна характеристика е вирусното натоварване (концентрация на вирусни клетки в 1 ml кръвна плазма). Колкото по-голяма е стойността на този индикатор, толкова по-силна е имунната система. Тя не може да попречи на възпроизвеждането на вируса.

След колко време се появяват антитела срещу ХИВ

Имуноензимен анализ за HIV се провежда 3 до 4 седмици след възможна инфекция. Правенето на това по-рано е безсмислено, защото антителата все още не са се формирали или са твърде малко. Ако се появи инфекцията и в кръвта няма HIV антитяло, тогава такъв тест се нарича фалшиво-отрицателен. За да се постави крайната диагноза, основната положителна реакция на тестовете за ХИВ не е достатъчна. Гаранция за надеждността на изследванията е преразглеждането. Нова диагноза се извършва след 3 месеца и след 6 месеца. Ако всички резултати са положителни, се планират допълнителни тестове.

Определените термини са средни. Във всеки отделен случай времето е различно. Ако част от заразения биоматериал, който се появи във вътрешната среда на тялото, е голям, защитните протеини - антитела - могат да се образуват в рамките на една седмица. Това е възможно при трансфузия на заразена кръв. В 0,5% от случаите, ХИВ може да бъде открит само след една година. Това се случва, когато броят на вирусните клетки е много малък.

Времето, когато антителата се появяват в тялото на заразеното лице:

  • в 90 - 95% от случаите - 3 месеца след предполагаемата инфекция;
  • в 5 - 9% от случаите, след 6 месеца;
  • в 0,5 - 1% от случаите - в по-късен момент.

Степени на показатели за наличие на антитела

Антителата, или имуноглобулини, се образуват при поглъщане чужди вируси и бактерии, както и всякакви вредни органични съединения. За всяка вирусна клетка има антагонист. Създават се уникални двойки: чужда клетка + имуноглобулин. След като идентифицират наличните в тялото антитела, лекарите получават информация за вирусите, които предизвикват появата им. Имуноглобулините са разделени на 5 групи:

  1. IgA - са отговорни за възстановяването на имунната система при настинки, кожни възпаления, обща интоксикация;
  2. IgE - са предназначени за борба срещу паразитите;
  3. IgM е пазител на тялото. Те "атакуват" вирусни клетки веднага щом влязат в кръвта;
  4. IgD - докато посоката на тяхната дейност не е известна. Такива имуноглобулини са не повече от 1%;
  5. IgG - осигурява резистентност в дългия ход на заболяването, е отговорен за защитата на плода в утробата и е основната бариера срещу вирусите при новородени. Повишаването на нивата на IgG в кръвта може да покаже развитието на ХИВ.

Нормална IgG (gigamole на литър)

Деца от 7,4 до 13,6 g / l

Възрастни от 7.8 до 18.5 g / l

За да се идентифицират антитела срещу ХИВ, се извършва количествен анализ. Отрицателният резултат е норма за здрав човек. Положителният тест показва проникването в организма на вирусни частици, срещу които се синтезират имуноглобулини.

Ако в графата "антитела" има "+", все още е твърде рано да се обобщи, планират се допълнителни проучвания. ХИВ инфекцията не винаги е причина за положителна реакция. Други причини за аномалии често се случват. Причини за фалшиви положителни реакции:

  • През първите 18 месеца от живота в кръвта на дете се съдържат имуноглобулини, получени от майката по време на бременност;
  • ток в тялото на автоимунните процеси;
  • наличие на ревматоиден фактор;
  • приемате лекарства.

Количественият анализ помага да се определи степента на заболяването. Ако броят на имуноглобулините е незначителен, болестта започва да се развива. Прогнозата в този случай е благоприятна. Високата концентрация на протективни протеини може да означава, че ХИВ е достигнал крайния етап - СПИН.

Изолирайте вирусите на HIV 1 и 2. Всеки от тях причинява образуването на определени антитела. Качественият анализ помага да се определи вида на антителата. Във формата на такива тестове се отбелязват номера 1 и 2 и данните се попълват пред всеки от тях.

Как се откриват антитела срещу ХИВ

Серумът се изолира от част от венозна кръв. Прилага се на твърда основа и се комбинира с вирусни клетки. След това повърхността се третира със специални ензими. В кръвта, където първоначално са били налични вирусите на имунната недостатъчност, след измиване се произвеждат антитела.

Лице, което трябва да дари кръв за антитела, 2 дни преди анализа трябва да се откаже от мастната и пикантна храна, да не пие алкохолни напитки. За 2 седмици се препоръчва да спрете приема на антивирусни лекарства. Всяко лекарство трябва да се консумира само когато е абсолютно необходимо. В навечерието на теста се препоръчва психологическа и физическа почивка. Анализът се извършва на празен стомах сутрин. Изследванията за наличието на антитела са признати за най-надеждни при диагностицирането на HIV инфекцията. Грешката е не повече от 2%.

Показания за ELISA, включително клинични признаци на HIV:

  • постоянен рецидив на инфекциозни заболявания;
  • продължителна треска;
  • висока вероятност за инфекция (незащитен секс или кръвопреливане от ХИВ-позитивен човек);
  • хоспитализация в болница;
  • Даряване на кръв от донори;
  • планиране на бременността и нейния курс;
  • травма с игла или друг остър предмет, заразени с биологичен материал;
  • преди операцията.

Признаците на ХИВ може да не се появят незабавно. В някои случаи заболяването не се чувства много дълго (до 10 години). Този факт предотвратява навременната диагноза и лечение. За да се разпознае човешкият имунодефицитен вирус във времето, е необходимо да се премине тест при най-малко съмнение. Ако диагнозата бъде потвърдена, всички сексуални партньори на заразените са идентифицирани. Те трябва да вземат тестове и да определят своя ХИВ статус. Медицинският персонал, работещ с пациенти с ХИВ, трябва да се подлага на редовни проверки

Тест за ХИВ / СПИН - p24 антиген в кръвта

Антиген р24 в серума обикновено липсва.

P24 антигенът е протеинът на нуклеотидната стена на HIV. Степента на първичните прояви след заразяване с ХИВ е следствие от възникването на репликативен процес. Антигенът p24 се появява в кръвта 2 седмици след инфектирането и може да бъде открит чрез ELISA в продължение на 2 до 8 седмици. След 2 месеца от началото на инфекцията, р24 антиген изчезва от кръвта. По-късно в клиничното протичане на ХИВ инфекцията отбележат втората покачването на белтъка р24 съдържание на кръв. Той попада в периода на формиране на СПИН.

Съществуващите тестови системи ELISA за откриване на антиген р24 се използват за ранно откриване на ХИВ при донори и деца, определящи прогнозата за хода на заболяването и мониторинг на терапията. метод ELISA има висока аналитична чувствителност, което дава възможност за откриване на HIV-1 р24 антиген в серум в концентрации от 5-10 пг / мл и по-малко от 0.5 нг / мл HIV-2, и специфичност. Все пак трябва да се отбележи, че съдържанието на р24 антиген в кръвта е подложено на индивидуални вариации, което означава, че само 20-30% от пациентите могат да бъдат идентифицирани с това изследване в ранния период след инфекцията.

Антитела за IgM антиген р24, класове и IgG в кръвта се появяват, като се започне от седмицата на 2-рия, достигайки връх в рамките на 2-4 седмици и се държат на ниво, различно време - антитела от клас IgM след няколко месеца, изчезва в рамките на една година от инфекция, и IgG антителата могат да се запазят в продължение на години.

Антитела срещу HIV 1 и 2 и HIV 1 и 2 антиген (HIV Ag / Ab Combo)

Антитела срещу HIV 1 и 2 и HIV 1 и 2 антиген (HIV Ag / Ab Combo) - пълно описание на диагнозата, индикации за прилагане, тълкуване на резултатите.

Антитела срещу HIV 1 и 2 и HIV 1 и 2 антиген (HIV Ag / Ab Combo) - антитела, образувани в тялото, когато са заразени с човешки имунодефицитен вирус.

Вирусът на човешката имунна недостатъчност (HIV) член на семейството на ретровирусите, той уврежда клетките на имунната система. Вирусът е от два вида, HIV-1 е по-често срещан, а HIV-2 е по-разпространен в африканските страни.

ХИВ се вгражда в човешки клетки, вирусни частици се размножават, което води до появата на антигени на вируса на клетъчната повърхност, към които се произвеждат съответните антитела. Откриването им в кръвта ви позволява да диагностицирате HIV инфекцията.

Идентифицирането на антитела срещу вируса на човешката имунна недостатъчност може да бъде три до шест седмици след влизането на вируса в кръвта. Силно увеличение на вируса в кръвта е характерно за етапа на първичните прояви, този период попада в третата или шестата седмица от момента на инфекцията и се нарича "сероконверсия". По това време инфекцията може да бъде открита в лабораторията, а клинично тя или изобщо не се проявява, или протича като студено заболяване с увеличение на лимфните възли.

След 12 седмици от момента на инфекцията антителата се откриват в почти всички случаи. На последния етап от заболяването, наречен СПИН, броят на антителата намалява.

В кое време от момента на инфекцията ще бъде открита ХИВ инфекция, зависи от тестовата система, използвана в дадена лаборатория. Комбинираните тестови системи от четвъртото поколение откриват HIV инфекция две седмици след като вирусът навлезе в кръвообращението. И първото поколение тестови системи откриха ХИВ само след 6-12 седмици.

При извършване на комбиниран анализ е възможно да се открие HIV антиген р24, който е капсидът на вируса. Тя се определя в кръвта след 1-4 седмици след инфекцията, дори преди концентрацията на антитела в кръвта да се увеличи (преди "сероконверсия"). Също така, в комбинирано проучване, антитела срещу HIV-1, HIV-2, са на разположение за диагностика две до осем седмици след инфекцията.

Преди сероконверсията в кръвта се откриват както р24, така и антителата срещу HIV-1 към HIV-2. След сероконверсия антитялото свързва р24 антигена, така че не се открива р24 и се откриват антитела срещу HIV-1 и HIV-2. След това, р24 и антителата срещу HIV-1, на HIV-2 отново се намират в кръвта. Когато човек, заразен с ХИВ, развива СПИН, развитието на антитела се прекъсва, така че антителата срещу HIV-1 и HIV-2 може да отсъстват.

Диагностика на ХИВ инфекция се извършва на етапа на планиране на бременност и по време на настоящата наблюдение на бременни жени, тъй като ХИВ инфекцията може да се предава от една жена на плода по време на бременност, раждане и кърмене.

Индикация за ХИВ диагноза

Случаен секс.

Треска без обективни причини.

Разширяване на лимфните възли в няколко анатомични области.

Подготовка за изследвания

Тестът за ХИВ се провежда 3-4 седмици след предполагаемата инфекция. Ако резултатът е отрицателен, анализът се повтаря след три и шест месеца.

От последното хранене до вземането на кръв, интервалът от време трябва да бъде повече от осем часа.

В навечерието на изключването от диетата на мастни храни, не пийте алкохол.

За 1 час, преди да вземете кръвта за анализ, не можете да пушите.

Не се препоръчва да се даде кръв веднага след флуороскопия, радиография, ултразвук, физиотерапия.

Кръвта се изразходва за изследване сутринта на празен стомах, дори чай или кафе се изключва.

Допустимо е да се пие обикновена вода.

В продължение на 20-30 минути преди проучването пациентът се препоръчва емоционална и физическа почивка.

Материал за изследване

Декодиране на резултатите от ХИВ диагнозата

Анализът е качествен. Ако не се открият антитела срещу ХИВ, отговорът е "отрицателен".

Ако се открият антитела срещу ХИВ, анализът се повтаря с друга серия от тестове. Вторият положителен резултат изисква метод на имуноблок, "златният стандарт" на ХИВ диагнозата.

норма: отрицателен отговор.

  1. Лицето не е заразено с ХИВ.
  2. Терминален етап на заразяване с ХИВ (СПИН).
  3. Серонегативен вариант на HIV инфекция (по-късно образуване на антитела срещу ХИВ).

Положителен отговор.

  1. Лицето е заразено с ХИВ.
  2. Тестът не е информативен при деца под 1 година и половина, родени от заразени с ХИВ майки.
  3. Фалшив положителен резултат в присъствието на антитела в кръвта на Epstein-Barr вируса, основният комплекс от хистосъвместимост, ревматоиден фактор.

Изберете симптомите, които ви засягат, отговорете на въпросите. Разберете колко сериозен е проблемът Ви и дали трябва да посетите лекар.

Преди да използвате информацията, предоставена от medportal.org, моля прочетете условията на потребителското споразумение.

Споразумение с потребителя

Сайтът medportal.org предоставя услуги по условията, описани в този документ. Чрез използването на уебсайта потвърждавате, че сте прочели условията на това Споразумение с потребителя, преди да използвате сайта, и приемете напълно всички условия на това Споразумение. Моля, не използвайте уеб сайта, ако не сте съгласни с тези условия.

Описание на услугата

Цялата информация, публикувана на сайта, е от референтен характер, информацията, взета от отворени източници, е референтна и не рекламира. Сайтът medportal.org предоставя услуги, които позволяват на потребителя да търси лекарства в данните, получени от аптеките в рамките на споразумение между аптеките и сайта medportal.org. За удобство при използването на сайта данните за лекарствата, хранителните добавки се систематизират и им се дава само един правопис.

Сайтът medportal.org предоставя услуги, които позволяват на потребителя да търси клиники и друга медицинска информация.

Ограничаване на отговорността

Информацията, поставена в резултатите от търсенето, не е публична оферта. Администрацията на сайта medportal.org не гарантира точността, пълнотата и (или) уместността на показваните данни. Администрацията на сайта medportal.org не носи отговорност за вредите или щетите, които бихте могли да причинят от достъп или невъзможност за достъп до сайта или от използването или невъзможността да използвате този сайт.

Приемайки условията на това споразумение, напълно разбирате и приемате, че:

Информацията на този сайт е за справка.

Администрацията на сайта medportal.org не гарантира липсата на грешки и несъответствия по отношение на обявената на сайта и действителната наличност на стоки и цени на стоките в аптеката.

Потребителят се задължава да изясни информацията, представляваща интерес за него, чрез телефонно обаждане в аптеката или да използва предоставената информация по свое усмотрение.

Администрацията на сайта medportal.org не гарантира липсата на грешки и несъответствия по отношение на работния график на клиниките, тяхната контактна информация - телефонни номера и адреси.

Нито medportal.org сайт, нито някоя друга страна, участващи в процеса на предоставяне на информацията, не носи отговорност за наранявания или щети, които може да страдат от факта, че се разчита на информация, предоставена на този сайт.

Администрацията на сайта medportal.org се ангажира и се ангажира да продължи да полага всички усилия, за да сведе до минимум несъответствията и грешките в предоставената информация.

Администрацията на сайта medportal.org не гарантира липсата на технически неизправности, включително във връзка с работата на софтуера. Администрацията на сайта medportal.org се ангажира да поеме възможно най-скоро възможно усилие, за да отстрани всички пропуски и грешки в случай на тяхното възникване.

Потребителят е предупреден, че администрацията на сайта medportal.org не носи отговорност за посещаването и използването му на външни ресурси, връзки към които могат да се съдържат в сайта, не предоставят одобрение на съдържанието им и не носят отговорност за тяхната наличност.

Администрацията на сайта medportal.org си запазва правото да спре експлоатацията на сайта, частично или напълно да променя съдържанието му, за да измени Споразумението за ползване. Такива промени се правят само по преценка на администрацията без предварително уведомяване на Потребителя.

Вие потвърждавате, че сте прочели условията на това Споразумение за ползване и напълно приемете всички условия на това Споразумение.

Рекламната информация, чието разположение на уебсайта има подходящо съгласие с рекламодателя, се отбелязва "върху правата за реклама".

Антиген p24 какво е това

Клинична и лабораторна диагностика на HIV инфекция има три направления:

  1. Установяване на факта на заразяване с ХИВ, диагностициране на ХИВ инфекция.
  2. Определяне на стадия на клиничния ход на заболяването и идентифициране на вторични заболявания.
  3. Прогнозиране на развитието на клиничния ход на заболяването, лабораторно проследяване на ефективността на лечението и страничните ефекти на антиретровирусните лекарства.

1. Идентифициране на ХИВ инфекцията, диагностициране на HIV инфекция

За определяне на HIV инфекцията се използват следните специфични показатели: HIV антитела, ХИВ антигени, HIV РНК и ДНК провирус. Антитела срещу HIV се определят чрез ензимен имуноанализ (ELISA) или имуноблот, която е по същество един вид IFA. Антигените (протеините) на HIV се определят чрез метода ELISA. С помощта на молекулярни генетични методи на полимеразна верижна реакция (PNR) и bDNA, HIV РНК и провирусна ДНК могат да бъдат определени. Добавянето на метода за хибридизация на нуклеинови киселини със специфични ДНК сонди прави възможно да се провери специфичността на ДНК последователностите, получени по време на PCR. Чувствителността на PCR е откриването на вирусни гени в една от петте хиляди клетки [27].

При първичната инфекция се наблюдава следната динамика на маркерите на ХИВ в кръвта на заразените хора. В първия месец като резултат от активиране на репликация процес настъпва рязко увеличение на вирусен товар (съдържанието на плазмена HIV РНК), след това, се дължи на маса разпространението на вируса и инфекция на прицелните клетки в кръвта и лимфните възли, става възможно определянето на провирусна ДНК. Най-важната диагностична стойност е фактът, че се открива ДНК на провируса, интегриран в генома на целевата клетка.

Вирусното натоварване отразява интензивността на репликативния процес в заразените клетки. По време на първичната инфекция, нива на вирусния товар са различни по време на инфекция, причинена от различни подвидове на ХИВ, но динамиката на промените в нея е приблизително същата. По този начин, когато са заразени с подтип В, ​​например, ако първия месец след влизане стойност вирусен товар от 700 копия / мл, след това през втори месец има намаляване до 600, в 3-та - 100, 4-та - 50 копия / ml. Тази динамика се наблюдава на фона на повишаването на съдържанието на специфични антитела срещу ХИВ в кръвта. Съдържанието на провирусна ДНК в HIV-инфектирани мононуклеарни кръв характеризира с относително постоянни по време на първите 6 месеца, с малки колебания в някои подвидове. Така, натоварването на РНК и ДНК не е идентично.

В етапа на инкубация, за известно време, не се образуват специфични антитела срещу HIV в количество, достатъчно да се определи чрез съществуващите лабораторни методи. Преди антителата да са регистрирани за много кратко време, появяването в кръвта на протеина Nef, който се потиска чрез репликативния процес, и структурния протеин р24. Антигенът р24 може да се открие в кръвта чрез метода на имуноензиментен анализ след 1-2 дни след инфектирането и да се определи до 8-та седмица, след което съдържанието му се намалява рязко. По-нататък в клиничния ход на ХИВ инфекцията има второ увеличение на кръвното съдържание на р24 протеина. Той попада в периода на формиране на СПИН. Изчезването на свободните (несвързани с антитела) основни протеини р24 и появата на специфични антитела срещу HIV протеини в кръвта показват началото на сероконверсия (Фигура 9.6).

Виремията и антигенемията предизвикват образуването на специфични IgM клас антитела (анти-р24, анти-gp41, анти-gpl120, anti-gp160). Свободните класове антитела IgM и IgG на протеин р24 могат да изглеждат като се започне от второто седмица, съдържанието им се увеличава в рамките на 2-4 седмици, като достига определено ниво, което продължава за месеца (IgM) и S (IgG) (Фиг. 9.7).

Появата на пълна сероконверсия, когато периферната кръв записва високи нива на специфични антитела IgG класа на структурните протеини на HIV р24, gp41, gp 120, gp 160, значително улеснява диагностициране на ХИВ инфекция. Антитела срещу HIV появяват в 90-95% от заразени в рамките на 3 месеца след заразяването, при 5-9% - в периода от 3 до 6 месеца след инфекцията и 0,5-1% - по-късна дата.

Въпреки факта, че антителата за ХИВ се появяват на последно място, основният лабораторен диагностичен индекс към днешна дата е откриването на специфични антитела чрез ELISA и имуноблотинг.

Данните са представени в Таблица 9.2 [Виж] и 9.3 [Виж], визуално демонстрират висока чувствителност на съвременните системи за имуноензимен тест за откриване на антитела срещу ХИВ, което надхвърля чувствителността на имуноблотинг. В някои случаи, когато се получи първичен положителен резултат в ELISA, той може да бъде потвърден при имуноблотинг само след 2-3 седмици.

В изследване на HIV-инфектирани пациенти (HIV-позитивни) с използване на тестови системи имуноблотинг водещи компании в света във всички случаи открити антитела към др160 и р24 / 25 антитела към други протеини, открити в 38,8-93,3% от случаите (таблица. 9.4 [Виж] ).

могат да възникнат трудности с детектиращи антитела при пациенти с HIV инфекция по време на периоди на масивна виремия и антигенемията когато съществуващите специфични антитела в кръвта, свързани с вирусни частици и репликативна процес преди време между нови антивирусни антитела. Такава ситуация може да възникне и да изчезне по време на инфекциозния процес [15].

При пациенти с първоначално отслабена имунна система, виремията и антигенемията се появяват по-рано и остават на високо ниво преди изхода на заболяването. При тези пациенти имат ниски нива на свободни антитела срещу HIV поради две причини - недостатъчна продукция на антитела от В-лимфоцити и свързване на вириони и разтворими протеини на ХИВ антитела, и следователно да се определи инфекция изисква тест система с повишена чувствителност или модификация на методите за анализ включва етапите на антитела освобождават от имунни комплекси [7].

Най-често намалява на антитела срещу HIV възниква поради причините, посочени в крайната фаза, когато HIV антитяло в серума не може да бъде уловена kroim не от методи за имуноанализ или метод immumoblotinga (Western блот). Също появата на специфични антитела срещу HIV имунен отговор в първите 4 месеца се характеризират с намаляване на кръв от заразени CD4 + - и CD8 + увеличение клетка. Освен това съдържанието на клетките, които носят CD4 и CD8 рецепторите, е стабилизирано и остава непроменено за известно време. Увеличаването на съдържанието на CD8-лимфоцитите е защитна реакция, защото клетъчно зависима кптотоксичност се осъществява от CD8 + лимфоцити, които са насочени към унищожаването на HPV-инфектирани клетки. Първоначално цитотоксични лимфоцити (CTLs) отговори на регулаторен протеин Nef вирусът, който играе важна роля за намаляване на вирусния (РНК) натоварване в HIV-инфектирани плазма през първите месеци. Тогава се формира отговор на CTL към другите, вкл. структурни, за HIV протеини, в резултат на което след 12 месеца след заразяването цитотоксичният ефект значително се увеличава.

Схеми на лабораторна диагностика на HIV инфекция

Предвид дадената динамика на специфичните маркери на ХИВ инфекцията на практика, препоръчително е да се придържаме към следните схеми на лабораторна диагностика при възрастни (Фигура 9.8-9.10).

Диаграмите отразяват три основни етапа на първичната лабораторна диагностика на ХИВ инфекцията:

  1. Прожекция.
  2. Референтен.
  3. Експерт.

Необходимостта от няколко етапа на лабораторна диагностика се дължи основно на икономически съображения. Например, разходите за провеждане на един експертен преглед чрез имуноблотинг с помощта на домашни тестови системи са до 40 щатски долара, скринингът (по метода ELISA) е около 0,2, т.е. съотношението е 1: 200.

В първия етап (Фигура 9.8) субектите се тестват за антитела срещу HIV, като се използва единична ензимна имуноанализна система, предназначена да открива антитела и за двата типа вирус - HIV-1 и HIV-2.

В предложените системи за тестване фирмите-производители използват като вирусен лизат, рекомбинантни протеини, синтетични пептиди като антигенна основа. Всеки от тези носители на антигенни детерминанти на ХИВ има свои собствени достойнства и недостатъци. Следователно, при избора на тестови системи с приблизително еднакви разходи, трябва да се предпочитат комплекти с най-висока чувствителност (за предпочитане 100%). Сред системите за тестване с еднаква цена и чувствителност, препоръчително е да се съсредоточим върху онези, които имат максимална специфичност.

Въз основа на лизата на вируса бяха създадени първите тестови системи за лабораторна диагностика на HIV инфекция. През 80-те години подобни системи за тестване се характеризират с чувствителност, по-малка от 100% и ниска специфичност, изразена с голям брой (до 60%) фалшиви положителни резултати.

Когато се образува вирион в лимфоцитна култура, неговата мембрана се създава от външната мембрана и следователно съдържа антигените на основния комплекс за хистосъвместимост от класове I и II. Това обстоятелство предизвиква фалшиви положителни реакции, ако в кръвта на пациентите присъстват антитела към хистосъвместими ало-антигени.

По-късно беше предложено да се използва култура от макрофаги, в която вирусните частици се образуват предимно вътреклетъчно чрез поникване, не от външната мембрана на клетката, а от мембраните на ендоплазмения ретикулум. Тази технология е намалила броя на фалшивите положителни резултати.

Един от най-добрите от най-важните характеристики - чувствителността и специфичността - имуно-призната тестови системи, които се използват в състава на пречистен вирусен лизат комбинация със синтетични пептиди, представляващи части antigenznachimye най вирусни протеини, или рекомбинантни протеини.

Чувствителността на системата за изпитване също зависи от характеристиките на другите компоненти на комплектите. По този начин тестовите системи, използващи конюгати, които разпознават антитела не само на IgG клас, но също така и на IgM и IgA, позволяват откриване на по-ранна фаза на сероконверсия. Прилагането на тестови системи, с които е възможно едновременно определяне на антивирусни антитела и антиген p24, е обещаващо, което прави още по-ранна лабораторна диагностика на HIV инфекция.

Първичният положителен резултат трябва да бъде проверен отново чрез повторна проверка на пробата в същата система за изпитване, но за предпочитане друга серия и друг лаборантен асистент. Ако при второ проучване се получи отрицателен резултат, проучването се провежда за трети път.

След потвърждаване на положителния резултат е желателно отново да се вземе кръвта и да се изследва за антитела срещу ХИВ като първична. Повторното вземане на кръв може да предотврати грешка поради неточността на етикетирането на епруветките и попълването на формулярите за препращане.

Серопозитивно на етапа на скрининг, кръвният серум се изпраща към референтните проучвания, проведени с помощта на две или три високоспецифични ELISA тестови системи. В случай на два положителни резултата, експерименталното изследване се провежда по метода на имуноблот.

Прилагане в референтните диагностични ензимен имуноанализ системи, които могат да бъдат използвани за разграничаване на специфични антитела срещу HIV-1 и HIV-2, улеснява по-нататъшната работа и позволява да се изследва положителна проба на експертно етап незабавно използване на съответния Имуноблотът (HIV-1 или HIV-2),

Експертното становище на лабораторията за ХИВ инфекцията се прави само въз основа на положителен резултат от имуноблотинг (Western blot). При провеждане на експертна диагностика е необходимо да се използва номенклатурата на гените и генните продукти на ХИВ, предложена от експертната група на СЗО през 1990 г. (Таблица 9.5 [Виж] ).

Специфичността на лентите на Имуноблотът следва да се оцени много внимателно и внимателно, като се използват резултатите от проучвания на контролен серум (положителен и отрицателен), които се провеждат паралелно с изучаването на експерименталните проби и Имуноблотът на пробата белязан ХИВ протеин (доставен от производителя към тестовата система). Тълкуването на резултатите следва да се извършва в съответствие с инструкциите, приложени към системата за изпитване. Обикновено критерий за позитивност задължително наличие на антитела към двата протеина (предшественик, външната или трансмембранен) ген, кодиран от ENV и възможното наличие на антитела към продуктите от другите две HIV структурните гени - GAG и пол (виж Таблица 9.6. [Виж] ).

В случай на получаване на съмнителен резултат е необходимо да се използва списъкът с препоръки за окончателното изясняване на резултатите от имуноблотинг (Таблица 9.7 [Виж] ).

Според препоръките на Руската Scientific методологичен център за профилактика и СПИН, той се счита за положителен резултат за наличие на антитела към поне един от GP41 на протеини, gp120, др160 в комбинация с антитела към други HIV-1 специфични протеини или без [10]. Тези препоръки се основават на опита със серуми от деца от нозокомиални огнища, които често определят антитела само на един от протеините на обвивката на вируса.

По-голямата част от основната разглежда от серопозитивни пациенти EIA се отнася до постепенно persistiruyushey генерализирана лимфаденопатия (PGL) или асимптоматична фаза. Следователно, в имуноблот (нитроцелулоза лента, на която са имобилизирани ХИВ протеини) се определя като правило, на следната комбинация от антитела срещу HIV-1: Антитялото на белтък на обвивката др160, др120 и GP41, кодиран от ген ENV, във връзка с антитела срещу р24 на основните протеини (протеини нуклеокапсид ген, кодиран от GAG) и P31 / 34 (ендонуклеаза, кодиран от гена Pol).

Положителната реакция само с протеините запуши устата и / или Pol може да настъпи в случай на ранна фаза сероконверсия и посочва инфекция, причинена от HIV-2, или неспецифична реакция.

В случай на получаване на съмнителен резултат, е възможно да се използват различни методики за изясняване на факта на ХИВ инфекция.

В зависимост от техническите възможности (наличност на диагностични комплекти и реагенти, оборудване със специално оборудване и обучение на персонала) експертната лаборатория провежда допълнителни диагностични изследвания (фиг.9.10).

В редица случаи е препоръчително да се използват молекулярни генетични методи за определяне на генетичните последователности на ХИВ в серума, кръвни лимфоцити или лимфни възли. Специфичността на ДНК последователностите, получени в резултат на PCR, може да бъде проверена чрез хибридизация на нуклеинови киселини със специфични ДНК сонди.

Методи с радио-имунопреципитация (RIP) и индиректна имунофлуоресценция (IPF) може да се използва за крайните серуми проверка с съмнителни резултати в имуноблотинг [14].

Откриването на HIV РНК в плазмата чрез качествен или количествен метод не е от значение за диагностицирането на HIV инфекцията. Такъв резултат трябва да бъде потвърден със стандартни методи, като имуноблотинг, 2-4 месеца след първоначалния съмнителен или отрицателен отговор.

Изолирането на ХИВ в клетъчната култура е крайната истина. Методът обаче е сложен, скъп и се извършва само в специално оборудвани изследователски лаборатории.

Съдържанието на CD4 + - клетки в кръвта е неспецифичен показател, но в случай на спор (IFA "+" имуноблот "-", наличие на клинични признаци на ХИВ / СПИН), тя може да се използва като ръководство за вземане на експертно решение. Ако лабораторията има способността да изпълнява само на иму, е необходимо да се придържат към препоръките, посочени в таблицата. 9.7 и на фиг. 9.9.

Лицата с експертно проучване серуми бяха получени съмнителни (неопределени) резултати, освен само за откриване на антитела срещу р17 (HIV-1) или р16 (HIV-2) трябва да се подложи на повторно тестване в продължение на 6 месеца (след 3 месеца). В случай на истинската HIV инфекцията след 3-6 месеца да се наблюдава спектъра на антитела "положителен" тенденция - нататъшно образование на антитела към други протеини на вируса. Подвеждаща реакция се характеризира със запазване за дълго време несигурно имуноблотинг модел на подозрителен или изчезване на лентите. Ако след този период на повторно имуноблотинг ще остане отрицателен или съмнителен, след това липсата на рискови фактори, клиничните симптоми, или други състояния, свързани с HIV инфекция, човек може да се счита серонегативни за антитела срещу HIV-1 и HIV-2.

Фалшиви положителни резултати, дължащи се на съдържанието в кръвта на пациентите антитела към МНС алоантигени, която е част от обвивката на HIV, са показани в Имуноблотът на ленти на gp41 и gp31 ниво. Причините за други неспецифични реакции (например към р24, често срещани при лица с автоимунни процеси) все още не са изяснени.

Подобряването на технологията за производство на имуно-ензимни системи за изпитване позволява да се постигне висока чувствителност - до 99,99%, докато чувствителността на метода на имуноблотинг е 97%. Следователно, отрицателният резултат при имуноблотиране с положителни резултати при ELISA може да покаже първоначален период на сероконверсия, характеризиращ се с ниско ниво на специфични антитела. Поради това е необходимо да се повтори теста след 1,5-2 месеца, т.е. продължителността на времето, необходимо за завършване на сероконверсията, достигайки концентрация на специфични антитела в кръвта, достатъчни за откриване чрез метода на имуноблот.

Положителен проучване резултат (и) на референтната или само скрининг етап на лабораторна диагностика на HIV инфекция, т.е. положителен резултат при всяка тестова система ELISA, резултатът не е потвърдено от методите експертни се тълкува в присъствието в кръвта на пациента на кръстосана реакция на антителата. При кръстосано взаимодействие антитела включват неспецифичните места на свързване на ХИВ протеини, или пептиди, които да се използват като антиген в основите на тестовата система, в която положителен резултат.

При липса на имунна недостатъчност и клинични признаци на HIV инфекция, такива лица се считат за серонегативни за антитела срещу ХИВ и трябва да бъдат извадени от регистъра.

Крайната диагноза на HIV инфекцията се определя само въз основа на всички клинични, епидемиологични и лабораторни данни. За да информира пациента за диагнозата за HIV инфекция, само лекуващият лекар има право.

Основният метод за потвърждаване (експертна) лабораторна диагностика на HIV инфекция е имуноблотингът. Въпреки това, предвид по-ниската си чувствителност в сравнение с ELISA, редица изследователи предложиха използването на комбинация от няколко тестови системи, за да се определи окончателно наличието на специфични антитела срещу ХИВ. Например, G. van der Groen et al. [30] предложи алтернативен метод за имуноблотиране за тестване на положителните резултати от скрининговия етап на лабораторна диагностика на HIV инфекция. Тя включва паралелно изследване на материала в три системи за изпитване, които се основават на различни методи за откриване на специфични антитела срещу HIV (няколко варианта на ELISA, реакция на аглутинация), използвайки антигени с различно естество. Авторите успели да изберат такива комбинации от тестови системи, чието използване осигурява 100% чувствителност и специфичност в сравнение с резултатите, получени при имуноблотинг.

На ниска цена на метод експерт диагноза е предимство, но липсата на информация, която специфични протеини са вирусни антитела в кръвта на пациента, не позволява да се оцени специфичността на реакцията във всеки случай, и проследяване на промените в спектъра на антитела в ранните етапи на сероконверсия.

Лабораторната диагностика на ХИВ инфекцията при деца, родени от майки, заразени с ХИВ, има свои особености [24]. От момента на раждане в кръвта на такива деца от дълго време (до 15 месеца), майчините антитела срещу ХИВ могат да циркулират. Плацентната бариера проникне само имуноглобулини IgG клас, по този начин разкрива детето nmmupoglobulinov HPV-специфични IgM и IgA класове позволява да се потвърди инфекцията, но отрицателен резултат не може да показва липса на HIV.

При деца на възраст под 1 месец няма репликация на HPV и единственият метод за проверка е PCR. Определянето на p24 антиген при деца над 1 месец също е потвърждаващ метод.

Липсата на антитела срещу ХИВ при новородени не означава, че вирусът не прониква в плацентарната бариера. Във всеки случай децата на заразени с ХИВ майки са подложени на лабораторно диагностично изследване и наблюдение в продължение на 36 месеца след раждането [10].

Резултатите от лабораторните тестове за маркери на HIV инфекция изискват внимателно тълкуване и трябва да се разглеждат само във връзка с епидемиологични и клинични данни. От друга страна, трябва да се отбележи, че въпреки високата чувствителност на съвременните методи негативните резултати от изследването не могат напълно да изключат наличието на HIV инфекция. Следователно, отрицателният резултат от изследването, например чрез имуноблотинг, може да бъде формулиран само като липса на специфични антитела срещу HIV-1 и HIV-2.

Диагностициране на ХИВ инфекцията при серонегативни пациенти

Качеството на системите за тестване, използвани в лабораторната диагностика на ХИВ инфекцията, се подобрява всяка година, тяхната чувствителност се увеличава. Въпреки това, високата променливост на ХИВ може да доведе до появата на нови видове, антитела, които може да не бъдат разпознати от съществуващите тестови системи. Освен това са известни случаи на атипичен хуморален отговор на имунната система на организма-гостоприемник към вируса. Така че, L.Montagnier през 1996 г. съобщава двама пациенти със СПИН, които през последните няколко години не са били открити в кръвта на специфични антитела, диагнозата се основава на клинични данни и потвърдено от лабораторни изолация само на HPV-1 в култивирани клетки. В такива случаи е необходимо да се използват препоръките на СЗО, съгласно които клиничната диагноза на ХИВ инфекцията при възрастни и деца е възможна при наличие на една от 12 болести на СПИН-индикатор:

  1. Кандидоза на хранопровода, трахеята, бронхите, белите дробове;
  2. екстрапулмонарна криптококоза;
  3. криптоспоридиоза с диария повече от един месец;
  4. увреждане на цитомегаловирус от който и да е орган (с изключение на и в допълнение към черния дроб, далака и лимфните възли при пациент, по-възрастен от 1 месец):
  5. инфекция, причинена от вируса на херпес симплекс, продължаваща повече от 1 месец при пациенти над 1 месец;
  6. лимфома на мозъка при пациенти на възраст под 60 години;
  7. лимфоцитна интерстициална пневмония при дете под 13 години;
  8. Дисиминирана инфекция, причинена от бактерии от групата Micobacterium avium intracellulare или M.Kansassii;
  9. пневмония пневмоцитис;
  10. прогресивна мултифокална левко-енцефалопатия;
  11. токсоплазмоза на централната нервна система при пациенти над 1 месец.

Наличието на едно от тези заболявания прави възможно диагностицирането на HIV инфекцията при липса на възможност за извършване на лабораторен кръвен тест за наличие на антитела срещу ХИВ или дори при получаване на серонегативен резултат.

  1. Федерален закон на Руската федерация "за предотвратяване на разпространението в Руската федерация на болестта, причинена от вируса на човешката имунна недостатъчност" от 30 март 1995 г.
  2. Zmushko E.I., Belozerov E.S. ХИВ инфекция / Ръководство за лекари. - Санкт Петербург: Питър, 2000 г. - 320 с.
  3. Isakov VA, Aspel Yu V., Bogoyavlensky GV и др. Опит в употребата на циклоферон в терапията на HIV инфекция и СПИН / Ръководство за лекари- SPb, 1997.- 60 p.
  4. Kozhemyakin LA, Bondarenko IG, Тиаптин АА Синдром на придобита имунна недостатъчност / Ръководство за лекари.- L.: Knowledge, 1990.-112 стр.
  5. Лобзин Ю.В., Казанцев АП Пътеводител за инфекциозни заболявания. - Санкт Петербург, 1996 г. - 712 стр.
  6. Lysenko A.Ya., Turyanov M.X., Lavdovskaya M.V., Podolsky V.M. ХИВ инфекция и заболявания, свързани със СПИН / Монография. - М.: "Rarog" LLP, 1996, - 624 p.
  7. Novokhatsky LS, Khlyabich GN Теория и практика на лабораторната диагностика на синдрома на придобита имунна недостатъчност (СПИН). - М.: ВИНИТИ, 1992 г., - 221 стр.
  8. Покровски VI, Покровски VV СПИН: синдром на придобитата имунна недостатъчност. - M.: Meditsina, 1988.- 43 p.
  9. Поровски VI ХИВ-инфекция или СПИН // Терапевт, архитект. - 1989. - Т. 61, № 11. - П. 3-6.
  10. Покровски В. ХИВ-инфекция: клиника, диагностика / Под общото. Ед. VV Pokrovskogo.- Москва: GEOTAR MEDICINE, 2000.- 496 p.
  11. Рахманова А. Г. ХИВ инфекция (клиника и лечение).- SPb: "SHA", 2000.- 367 стр.
  12. Препоръки за употребата на антиретровирусни лекарства при възрастни и юноши, инфектирани с вирус на човешката имунна недостатъчност // Consilium Medicum supplement. Януари 2000 г., - 22 стр.
  13. Smolskaya Т. Т., Leninskaya P. P., Shilova E.A. Serologicheskaya диагностика на ХИВ-инфекцията / Методологически наръчник за лекари.- SPb, 1992.- 80 стр.
  14. Smolskal TT Второто десетилетие на живота в условията на SPPD: Lessons and Problems / Act Speech. - SPb., 1997.- 56 стр.
  15. Хайтов Р.М., Игнатиева ГА СПИН.- М., 1992.- 352 стр.
  16. Connor S. Research показва как ХИВ изчерпва тялото // Brit. Mod. J.- 1995.-том 310.-П. 6973-7145.
  17. Burcham J., Marmor М., Dubin N. et al. CD4 е най-добрият предсказател за развитието на СПИН в кохортата на ХИВ-инфекциозни хомосексуални мъже (J. AIDS, 1991.-jN "9.- P.365.
  18. Furlini G., Vignoli М., Re MC, Gibellini D., Рамацоти Е., Zauli G.. La Placa М. човешки имунодефицитен вирус тип I взаимодействие с мембраната на CD4 + клетки индуцира синтеза и ядрената транслокация на 70К протеин на топлинен шок J.Gen. Virol.- 1994.- Vol 75, pt 1.- стр. 193-199.
  19. Gallo R. С. Механизъм на индуциране на болестта от HIV / / J.AIDS / 1990 / - N3.- P. 380-389.
  20. Gottlieb М. S., Schroff R., Schanker Н. et al. Pneumocystis carinii пневмония и лигавична кандидоза в преди това хомосексуален мон // Сега Англия J. Med. - 1981 г. - том. 305. - стр. 1425-1430.
  21. Harper M.E., Marselle L.M., Gallo R.C., Wong-Staal F. Откриване на лимфоцити, експресиращи човешки Т-лимфотропичен вирус тип III в лимфа. Natl. Акад. Sci. U.S.A. 1986. Vol. 83.-N 2.- P. 772-776.
  22. Hess G. Клинични и диагностични аспекти на ХИВ-инфекцията. Mannheim: Boehringer Mannheim GmbH, 1992. 37 p.
  23. Hu.D., Dondero T.J., Ryefild M.A., et al. Нарастващото генетично разнообразие на HIV / / JAMA.- 1996. - N 1.- P. 210-216.
  24. Lambin P., Desjobert Н., Debbia М. et al. Серумен неоптерин и бета-2-микроглобулин в анти-HIV позитивни кръводарители // Lancet.- 1986.- том 8517. - стр. 1216.
  25. Малдонадо И. А., Ретру А. Диагностика на детска ХИВ болест // Степента на познаване на СПИН, Fd. Cohen P.T.; Санде М. А. Войбърдинг. 1994.- стр. 8.2.1-8.2.10.
  26. McDougal J. S., Kennedy M.S., Sligh J.M. et al. Свързване на HTLV-III / LAV към Т4 + Т-клетки от комплекса на 110К молекулата и Т4 молекулата / Science.-1985.- Vol.23.- P. 382-385.
  27. Montagnier L., Gougeon М. L., Olivier R. et al. Фактори и механизми на СПИН патогенезата // Наука, предизвикваща СПИН. Базел: Karger, 1992. - стр. 51-70.
  28. Paterlini P., Lallemant-Le C., Lallemant М. et al. Полимерна верижна реакция за изследване на майката за предаване на HIV-1 на дете в Африка // J. Med. Virol. - 1990.- Vol.30, N 10.- стр. 53-57.
  29. Polis M.A., Masur H. Предсказване на прогресията към СПИН // Amor. J. Med. - 1990.- Vol.89, N 6.- стр. 701-705.
  30. Roddy М. М., Grieco М. Н. Повишени нива на разтворими IL-2 рецептори в серума на HIV-инфектирани популации // СПИН Res. Hum. Ретровир. - 1988 г. - том 4, № 2. - стр. 115-120.
  31. Ван дур Гроен. G., Van Kerckhoven I. et al. Опростен и по-евтин в сравнение с традиционния начин за потвърждаване на ХИВ инфекцията // Бил. WHO.- 1991.- Т. 69, No. 6.- pp. 81-86.

източник: Медицинска лабораторна диагностика, програми и алгоритми. Ед. проф. Karpischenko AI, Санкт Петербург, Интермед, 2001


Статии Хепатит