Какво представлява РНК на вируса на хепатит С?

Share Tweet Pin it

Изследването на РНК на вируса на хепатит С е най-важната процедура, която позволява определянето на продължителността и методите за лечение на пациенти с голяма точност. Диагнозата на заболяването се състои от няколко различни кръвни теста, като:

  • маркери на хепатит С (анти-HCV);
  • откриване на РНК на вируса на хепатит С (HCV РНК).

Първото проучване се прави с първото подозрение за хепатит. Вторият вариант е най-значим при лечението на HCV РНК, затова го разгледайте по-подробно.

Какво представлява вирусният хепатит C?

Вирусният хепатит С или HCV е инфекциозно заболяване, което засяга черния дроб. Заразяването с вируса се осъществява чрез кръвта. Може да се заразите с кръвопреливане, когато правилата за стерилизация на медицински инструменти не се спазват. Има по-малко случаи, когато заболяването се получава по полов път или от бременна майка до плод. Хепатит С е от 2 вида.

Хроничният хепатит С е най-опасен. Това е форма на болест, която може да продължи цял живот. Това води до сериозни проблеми във функционирането на черния дроб, като цироза или рак. При 70-90% от заразените хора болестта преминава в хроничен стадий.

Най-важната опасност от хепатит C е, че той преминава тайно, без иктерични признаци. В този случай, често се оплакват от вдигането на температура, гадене и повръщане, физическа слабост, умора, загуба на апетит и тегло. По този начин срещу малък уплътнение чернодробна тъкан се среща достатъчно често злокачествена трансформация. По тази причина вирусният хепатит С често се нарича "бомба със закъснител" или "любящ убиец".

Друга особеност на болестта е нейното много бавно развитие, което се оценява на десетки години.

По правило заразените не чувстват никакви симптоми и не подозират истинското си състояние. Често заболяването може да бъде идентифицирано само когато се отнася до лекар по друг въпрос.

Рисковата група включва:

  • деца, които са получили вирус на хепатит С от майки;
  • наркомани;
  • хора, които са пробили части от тялото или са правили татуировки нестерилни инструменти;
  • получава донорска кръв или органи (до 1992 г., когато не е извършена хемодиализа);
  • хора, заразени с ХИВ;
  • Медицински работници в контакт с заразени пациенти.

Определяне на РНК на хепатит С

Определяне на хепатит С вирус РНК, също наречен хепатит С PCR, това проучване на биологичния материал (кръв), с която може да се идентифицира в тялото на първичната наличието на вируса genomateriala хепатит В (даден вирус е единична частица от РНК).

Основният метод за изпитване е PCR или метод на полимеразна верижна реакция.

Има два вида кръвни тестове за определяне на HCV РНК:

Тест за качество

Провеждането на качествен анализ дава възможност да се определи дали вирусът е в кръвта. Всички пациенти, които имат С-хепатитни антитела, трябва да преминат този тест. Със своите резултати можете да получите 2 отговора: "налице" или "липсва" вируса. При положителния резултат от теста (намерен) е възможно да се прецени активното умножение на вирус, който заразява здравите клетки в черния дроб.

Изпитването, извършено за висококачествена PCR, е настроено на специфична чувствителност от 10 до 500 IU / ml. Ако в кръвта на вируса на хепатит В в специфичното съдържание на по-малко от 10 IU / мл, откриване на вируса може да бъде невъзможно. Много ниска стойност на специфичното съдържание на вируса се наблюдава при пациенти, за които е предписана антивирусна терапия. Ето защо е важно чувствителността на медицинската система да е висока за диагностициране и определяне на качествен резултат в полимеразна верижна реакция.

Често полимеразната верижна реакция на С-хепатита се извършва веднага след намирането на съответните антитела. Следващите тестове, когато преминава антивирусната терапия, се провеждат на 4-та, 12-та и 24-та седмица. Друг анализ след прекратяването на PVT се извършва след 24 седмици. След това - веднъж годишно.

Количествено изпитване

Количественият анализ на PCR РНК, понякога наричан вирусен товар, определя концентрацията (специфичното съдържание) на вируса в кръвта. С други думи, вирусният товар се дефинира като определено количество вирусна РНК, която може да бъде в определено количество кръв (обичайно е да се използва 1 ml, равен на 1 cm в куб). Единиците за резултатите от теста са международни (стандартни) единици, разделени на един милилитър (IU / mL). Съдържанието на вируса понякога изглежда различно, зависи от лабораториите, където се провежда изследването. За хепатит С, количественото определяне понякога използва стойности като копия / ml.

Трябва да се разбере, че няма специфична зависимост от тежестта на С-хепатита върху концентрацията на този щам в кръвта.

Проверката на "вирусния товар" ви позволява да определите степента на инфекциозност на заболяването. Така че рискът от заразяване с вируса на друг човек се увеличава с увеличаване на концентрацията на хепатит в кръвта. В допълнение, високото съдържание на вируса намалява ефекта от лечението. Следователно, малък вирусен товар е много благоприятен фактор за успешно лечение.

Освен това тестът за хепатит С и неговото определяне чрез PCR играят голяма роля при прилагането на терапия срещу болестта и определяне на успеха на лечението. Въз основа на резултатите от теста се планира рехабилитационния курс. Например, при твърде бавно намаляване на специфичната концентрация на вируса на хепатит, антивирусната терапия се удължава и обратно.

В съвременната медицина се смята, че товарът е повече от 800000 ME / ml е висок. Натоварването е повече от 10000000 ME / ml, което се счита за критично. Но експертите от различни страни и до днес не са имали същото мнение относно границите на вирусния товар.

Честота на количественото изпитване

Като цяло количественият анализ за хепатит се извършва преди антивирусната терапия и 3 месеца след края на лечебните процедури, за да се определи качеството на терапията.

В резултат на количественото изпитване се счита количествена оценка на резултатите от посочената по-горе проба. В резултат на това няма да бъде направена присъда "под измерения диапазон" или "в кръвта няма да бъде открита".

Параметърът на чувствителността на качествения тест обикновено е по-нисък от чувствителността на количествения анализ. Липсващият протокол показва, че и двата типа анализи не са открили РНК на вируса. При теста "под измерения обхват" количественият анализ вероятно не откри хепатитна РНК, въпреки че това потвърждава наличието на вирус с много малко специфично съдържание.

Хепатит C и неговите генотипове

Определянето на генотипа на вируса на хепатит С РНК диагностициране на наличието на различни генетични видове хепатит С. Науката не познава повече от 10 вида генома на вируса, но за медицинската практика достатъчно разграничат няколко генотипове, които имат най-голям дял в региона. Определянето на генетичния тип играе ключова роля при избора на времето за лечение, което е много необходимо, ако се вземе предвид широк спектър от странични ефекти на хепатитните лекарства.

Методи за лечение на вирусен хепатит С

Единственият ефективен начин за лечение на вируса на хепатит обикновено е комбинация от 2 лекарства: интерферон-алфа заедно с рибавирин. Отделно, тези лекарства не са толкова ефективни. Препоръчваната доза лекарства и времето на приложение трябва да се предписват само от лекаря и поотделно за всеки пациент. Лечението с тези лекарства може да продължи от 6 до 12 месеца.

Днес лекарствата не са изобретени, които гарантират 100% възстановяване от вируса. Въпреки това, при правилно избрано лечение лечението на пациентите може да достигне до 90% от броя на случаите.

Качествен анализ на PCR за хепатит С

Хепатитът е сериозна болест, която има много причини за появата. В основата на неговото развитие е прякото или непряко увреждане на черния дроб. Като се има предвид значението му за целия организъм, може само да се досети колко лоша е патологията. В тази статия ще разгледаме по-подробно характеристиките на курса и лабораторната диагностика на хепатит С.

Причината за заболяването е вирусен агент, който се отнася до РНК-съдържащи патогени. Тя има отличителна черта - способността му да мутира, т.е. да променя структурата си. Поради тази инфекция се избягва атаката на имунната система и в повечето случаи води до хронично възпаление в черния дроб.

Предвид съществуването на различни подтипове на вируса, изборът на лекарства трябва да се извършва, като се вземат предвид резултатите от генотипа. Въпреки дългото проучване на болестта и особеностите на структурата на HCV, не е възможно да се развие специфична ваксина срещу болестта.

Трудностите на ранната диагностика са в асимптоматичния ход на хепатита, в резултат на което човек се обръща към лекар в стадия на цироза. За да се открие болестта във времето, се изискват редовни физически прегледи. Само чрез лабораторни изследвания на кръвта може да се идентифицира HCV и да се предотврати инфекцията на други хора. Фактът, че носителят на инфекцията, не може дълго време да знае за патологията и да продължи да предава вируса на здрави хора.

Пътища на предаване

Вирусът в повечето случаи се разпространява в кръвта, тъй като съдържа най-голяма концентрация на патогенни агенти. По този начин инфекцията се предава:

  • с хемодиализа;
  • когато бодеш с игла;
  • в хода на битката, когато кожата е ранена и се появява хемоконтакт;
  • с кръвопреливане (кръвопреливане).

Вероятността за инфекция с интимна интимност е незначителна, тъй като спермата и вагиналното изхвърляне съдържат малък брой патогени. Рискът от инфекция нараства значително, ако се наруши целостта на гениталната лигавица. Това се наблюдава при агресивен и анален секс.

Що се отнася до вертикалния режим на предаване на инфекцията, той се извършва в хода на раждането. В периода на бременността патогенът не може да проникне в плацентата към ембриона. При естествен вид патогенният агент се прехвърля на детето при травма на кожата му, когато се наблюдава контакт с кръвта на майката.

След проникването на патогена в здрав организъм започва синтеза на антитела, които са защита срещу инфекция и принадлежат към имунните структури. Те се откриват по време на първоначалното изследване на лице с помощта на ELISA.

За потвърждаване на диагнозата пациентът се подлага на полимеразна верижна реакция. Това е анализ за идентифициране на генетичния материал на патогенен агент и определяне на вирусното натоварване.

Лабораторна диагностика на хепатит С

Лабораторната диагностика започва с ензимен имуноанализ. Основната му задача е да открива антитела, произведени срещу патогена. Ефективността му е почти 95%. Благодарение на това изследване в предклиничния стадий е възможно да се идентифицира вирусния носител и да се изпрати за по-нататъшно изследване.

Качественият анализ на ELISA показва наличието или отсъствието на имуноглобулини в кръвта на пациента. Резултатът може да бъде "положителен" или "отрицателен". След като получи първия вариант на отговора, човек отива на следващия изпит - PCR. Цената му зависи от качеството на реагентите и лабораторията. Цената на полимеразната верижна реакция може да достигне 4000 рубли.

Характеристики на PCR

При полимеразната верижна реакция дори малко количество биологичен материал дава възможност да се оцени вирусното натоварване в кръвта, т.е. да се изчисли концентрацията на патогени в един милилитър течност.

С появата на PCR, диагнозата на хепатита беше много по-опростена. Анализът позволява да се идентифицира HCV РНК, да се установи етапът на инфекциозния процес и инфекциозността на вирусния носител.

Има няколко вида генетична диагноза:

  1. качествен анализ на PCR за хепатит С - потвърждава наличието или отсъствието на HCV в кръвта на изследваното лице:
  2. количествено, поради което е възможно да се изчисли концентрацията на вируси и да се установи стадият на заболяването. Резултатът е даден в IU / ml или копия / ml (в зависимост от лабораторията);
  3. генотипирането е необходимо за определяне на генотипа на HCV. Това е необходимо за точен избор на лекарства, които ще бъдат най-ефективни в този случай. Анализът индиректно показва тежестта на патологичния процес в черния дроб. Така че, при третия генотип на патогена, най-често се наблюдава стеатоза, чието развитие е натрупването на мазнини в хепатоцитите (неговите клетки). Освен това вирусът влияе върху резултата и продължителността на терапевтичния курс.

Качествен анализ на PCR за хепатит С

Първата стъпка в лабораторията е изследването на биологичния материал за наличието на HCV РНК. Важно е да запомните, че качественият анализ за хепатит С има известно ниво на чувствителност и затова не винаги може да даде правилния отговор. В този случай се препоръчва да се извършва повторна лабораторна диагностика, като се използват други реагенти.

За да се получат надеждни резултати, трябва да се използва система за изпитване с чувствителност най-малко 50 IU / ml.

Резултатът от диагнозата може да бъде "положителен" или "отрицателен". Ако патогенът не се открие в кръвта, проучването завършва. Когато в пробата се открие патогенен агент, след това се извършва количествено отчитане на вирусното натоварване.

Погрешен отрицателен отговор се получава при прекъсване на технологичния процес, например активните компоненти, които потискат изграждането на копия на патогена, влизат в околната среда. По този начин не е възможно да се покаже истинската картина на кръвта, поради която не е диагностицирана човешката инфекция.

Може да се получи фалшив положителен резултат, ако събирателната тръба за биологичен материал, както и околната среда за изследването, са били замърсени. В допълнение, такъв анализ на реакцията е възможен със смесена инфекция, когато черният дроб е засегнат от няколко вируса, например хепатит C и D.

Показания за качествени изследвания

Лекарят може да определи качествено проучване на пациент за откриване на РНК на вируса на хепатит С:

  • когато получават положителен или съмнителен отговор на ензимния имуноанализ;
  • за проверка на диагнозата;
  • определяне на вирусното натоварване;
  • поставяне на етапа на заболяването;
  • диагноза на смесена инфекция. Често хепатит С засяга черния дроб едновременно с вируса "D";
  • определяне на терапевтични тактики, като се вземе предвид генотипът на патогена;
  • оценка на динамиката на промените на фона на лечението с антивирусни лекарства.

Предимствата на полимеразната верижна реакция включват:

  1. висока чувствителност на техниката, която позволява да се установи фактът на инфекция в предклиничния стадий;
  2. идентифициране на генетичния материал на патогена, а не антитела към него;
  3. възможността за създаване на подтип на патогенен агент;
  4. висока скорост на диагностика, тъй като не е необходимо да се засяват материали на хранителна среда, но е достатъчно да се използват специфични системи за тестване. Човек получава резултат след 5 часа;
  5. гъвкавост. Анализът дава възможност за идентифициране на всеки генетичен материал (РНК, ДНК). Поради това лекарят може да потвърди хепатит С и други заболявания (В);
  6. възможността за откриване на латентна инфекция.

Количествено изследване

При изследването на кръвта с полимеразна верижна реакция е възможно да се изчисли броят на патогени в определен обем биологичен материал. Индикаторът е представен в IU / ml. Поради анализа е възможно да се установи степента на инфекциозност на пациента, да се определи етапът на инфекциозния процес, както и да се оцени ефективността на лекарствената терапия.

Въз основа на PCR, експертът определя кои дози от лекарства могат да блокират размножаването на патогени. В допълнение се определя продължителността на антивирусното лечение и прогнозата за живота. Важно е да запомните, че тестовите системи са много чувствителни, така че методът дава възможност да се потвърди инфекцията на човек дори в предклиничния стадий.

определяне на генотипа

Предвид способността на причиняващия агент да мутира, да определи тактиката на лечението и избора на антивирусни лекарства, е необходим неговият генотип. Например, лечението на хепатит HCV 1 продължава 48 седмици, като положителната тенденция се наблюдава само в 60% от случаите. Генотипи 2 и 3 имат по-благоприятна прогноза. Антивирусните препарати се предписват за 8 месеца и тяхната ефективност достига 85%.

Според статистически данни в повечето случаи HCV 1, 2 и 3 са регистрирани на територията на Руската федерация.

При дешифриране на лабораторно изследване може да се посочи такъв отговор - "не е написан". Това означава, че вирусът циркулира в кръвоносната система на пациента, което не може да бъде разпознато от системата за тестване. Резултатът от анализа в този случай показва инфекцията на лице, нетипично за дадена географска област на причинителя.

Как да получите надеждни резултати?

За качествените изследвания на PCR за откриването на РНК на причиняващия агент на хепатит С е показал правилните резултати, е необходимо да се спазват изискванията за подготовка за лабораторна диагностика:

  1. вземането на кръв се извършва на празен стомах, а "гладът" не трябва да бъде по-кратък от 8 часа;
  2. два дни преди изследването се препоръчва да спрете да пиете алкохол и да отхвърляте остри, мазни и пушени ястия;
  3. премахване на въвеждането на лекарства, които намаляват кръвосъсирването, като хепарин. Ако тези лекарства са предписани по причини, свързани с живота, трябва да уведомите за това лекаря. Освен това специалистът трябва да е запознат с приемането на други лекарства, които могат да повлияят на резултата от лабораторния тест;
  4. В навечерието на събирането на биологичен материал физиотерапевтичните процедури не трябва да се извършват и да се подлагат на тежки физически усилия.

Резултатите от анализа могат да бъдат повлияни не само от човека, който дарява кръв, но и от други фактори, а именно:

  • лошо събиране на кръв;
  • неспазване на препоръките за транспортиране на биологичен материал;
  • недостатъчно обучение на лабораторни работници;
  • неспазване на изследователските техники;
  • въвеждането на антикоагуланти (хепарин) в навечерието на вземането на кръвни проби. Тази група лекарства намалява коагулацията, като по този начин забавя работата на реагентите.

В различните лаборатории диагностичният отговор може да е леко различен, но тези грешки не оказват влияние върху крайния резултат от изследването.

Особено внимание се обръща на видовете системи за тестване, които се използват в лабораторията. Често се предпочитат реагентите с висока чувствителност. Това е важно за пациентите с ниско вирусно натоварване, тъй като е трудно да се открият.

Колко често се извършва лабораторен тест?

По принцип полимеразната верижна реакция се провежда при хора, които са тествани за антитела срещу вируса на хепатит в имуноанализ. В този случай той е назначен да потвърди факта на инфекция на човек и да установи етапа на заболяването. Освен това анализът ви позволява да определите подтипа на вируса, който е особено важен при избора на лекарства.

Следващият период за задължително лабораторно изследване е 3 месеца от началото на антивирусната терапия. Диагнозата дава възможност да се оцени ефективността на лекарствата, да се коригира дозата или да се замени.

В допълнение към основните анализи PCR може да се извърши допълнително на 4 и 24 седмици от началото на лечението. Положителната прогноза на заболяването се потвърждава от намаляването на вирусния товар след три месеца от лечението. Така че, например, тя трябва да намалее от 1 млн. IU / ml до няколко стотин хиляди.

Ако концентрацията на патогенните агенти в кръвта остане на същото ниво или леко се увеличи, това показва неефективността на антивирусните агенти и изисква тяхното заместване. С помощта на PCR в края на лечението е възможно да се потвърди възстановяването на пациента.

За да се интерпретират правилно резултатите от лабораторната диагностика, се изисква консултация с специалист по хепатология или инфекциозни болести. Предвид високата честота на фалшиви отговори за ELISA, анализът се използва изключително за първичен скрининг. За по-задълбочено изследване на пациента се използва полимеразна верижна реакция.

Все още мислите, че е трудно да се лекува хепатит С?

Съдейки по това, че сега четете тези редове, победата в борбата срещу чернодробните заболявания не е на ваша страна. И вече сте се замислили за терапията с интерферон? Това е разбираемо, защото хепатит С е много сериозно заболяване, тъй като правилното функциониране на черния дроб е гаранция за здравето и благополучието. Гадене и повръщане, жълтеникав или сивкав тонус на кожата, горчивина в устата, потъмняване на урината и диария. Всички тези симптоми не са ви познати от слухове.

Но може би е по-правилно да се третира не последствие, а причина? За лечение препоръчваме да използвате съвременни руски медикаменти - sophosbuvir и daklatasvir. Прочетете повече >>

Маркери на хепатит С и тълкуване на резултатите от количествения анализ на HCV РНК

Напоследък в търсачките на интернет ресурси често се появява заявката "количествен анализ на хепатита с декодиране".

В действителност, хепатитният вирус е чест и опасен, болестта засяга черния дроб. Името му идваше от латвийката. хепатит - възпаление на черния дроб. Инфекцията се случва чрез кръвта или чрез сексуален контакт, възрастни са по-склонни да се разболеят на възраст от 25 до 50 години.

Има няколко вида болести. Хепатит С няма ярък израз, но в 40-70% от случаите той преминава в хронична форма, може да причини цироза на черния дроб и рак. Това заболяване изисква точна диагноза и тълкуване на получените данни, за които се разработват методите. Едната е РНК анализ на HCV РНК чрез PCR.

РНК анализ на HCV РНК чрез PCR

РНК (рибонуклеинова киселина) е вид макромолекула, един от компонентите на живата клетка. РНК отговаря за кодирането на генетичната информация. Вирусът на хепатит С съдържа РНК молекула и има навика да мутира. Има шест от неговите подтипове, както и много подвидове.

Болестта в хроничния стадий води до фиброза на черния дроб - нарастват съединителните тъкани, структурата на органа постепенно се нарушава. Фиброзата се поддава на своевременно лечение, тъй като черният дроб не е претърпял все още разрушителни процеси. За разлика от цирозата, тежко необратимо чернодробно заболяване, при което фиброзата може да се развие, без да се вземат необходимите мерки навреме.

Лице, което има подозрение, че има вирус на хепатит, определя антитела срещу него. Ако те не са налице - заболяване се изключва, в тяхно присъствие прибягват до метод PTSR (полимерна верижна реакция). В молекулярната биология тя е експериментална, но заема водещо място сред методите за диагностициране на инфекциозни заболявания. С помощта на него може значително да се увеличи концентрацията на фрагменти от молекули в пробата. 10 дни след заразяването, РНК вече е възможно да се открие в кръвта.

Този метод е единственият, който позволява да се идентифицира болестта в ранните етапи. По друг начин (напр. Биохимичен кръвен тест) това не може да се направи, тъй като черният дроб все още не е засегнат.

Методът е открит през 1993 г. от биохимика Кари Мълис, за която получава Нобелова награда. PCR е пробив в медицината и науката, тъй като позволява бърза и точна идентификация на инфекции в кръвта и други биологични материали на човек. С други думи, методът ускори развитието на диагнозата на инфекциозни заболявания.

РНК анализът на HCV РНК чрез PCR е ефективен поради следните причини:

  • Има добра чувствителност - дори се открива малко количество вирус в кръвта;
  • самият вирус се определя, а не страничните продукти, създадени от него;
  • се определя видът патоген.

Разлики в количествения анализ на HCV РНК от качествен

Методът на PCR включва два основни метода за изучаване на биологичен материал за търсене на вируса на хепатит С:

Тези проучвания имат различни задачи.

Качествен анализ на хепатита с декодиране потвърждава наличието на вируса, след като антителата към болестта вече са открити в кръвта. Ако проучването даде положителен резултат, тогава заболяването е установено. С други думи, човек е заразен. Ако се получи отрицателен резултат, това означава, че лицето не е заразено или има твърде малко концентрация на вируса. Тази концентрация не се открива по този начин.

Освен това клиничната картина на заболяването се основава на маркери за хепатит С и тълкуване на анализа. Основните маркери са имуноглобулините (антителата) М и Ж. Тяхното присъствие в кръвта на пациента показва нехарактерни процеси за здрав организъм. Въз основа на наличието на тези антитела пациентът обикновено се диагностицира с първична диагноза.

Количествен анализ се предписва за първоначално откриване на антитела и, ако е необходимо, за лечение.

Също така се предписва количествен анализ за хепатит С за откриване на смесен хепатит (инфекция с няколко вируса).

Количественият анализ с декодиране се осъществява с цел:

  • изясняване на окончателната диагноза;
  • подреждане на прогнозите относно хода на заболяването и неговото лечение - удължаване, намаляване на лечението или промяна в тактиката;
  • мониторинг на терапията.

За да сте сигурни, че резултатите са верни, трябва да следвате предписания режим, преди да дарите кръвта:

  • дойдете в лабораторията на празен стомах, последният път, когато можете да приемате храна, може да бъде 8 часа преди процедурата;
  • два дни преди изследването са забранени алкохолът, мазнините и пържените храни;
  • ултразвук, масаж, физиотерапия преди изследването не може да се проведе;
  • за деня, приемането на лекарства е забранено, ако приемането на отделни лекарства не може да бъде отменено, това се съобщава преди вземане на кръвни проби;
  • преди процедурата се препоръчва максимално да се намалят физическите и нервните натоварвания.

Изпълнението на тези изисквания ще бъде ключът към получаване на правилните резултати от количествения анализ за хепатит С.

Декодиране на количествен анализ

След получаване на индикаторите за количествен анализ е необходимо да се разчитат резултатите от тестовете за хепатит С. Резултатите се изчисляват както в единици ME / ml, така и в копия на ml. За да се получат резултатите, отразени в копието, се използват няколко метода.

  • HCV монитор (конверсионен фактор за ME - 2,7);
  • LCX HCV РНК (конверсионният фактор за ME е 3.8).

Таблица. Декодиране на количествен анализ на HCV РНК чрез PCR.

HCV, РНК количествено [PCR в реално време]

Проучване за идентифициране на причинителя на хепатит С (HCV), в която съгласно метода от реално време полимеразна верижна реакция (RT-PCR) се определя от наличието на генетичен материал (RNA) на вируса и обем (вирусното натоварване) в кръвната проба.

HCV РНК може да бъде открита при концентрация под долната граница на линейния обхват на концентрациите. Линейният обхват на концентрацията е диапазонът, в който броят на копията на патогена може да бъде прецизно изчислен. За този анализ линейният диапазон на концентрациите на HCV ДНК, определен от детектора за усилване, е 7,5 × 10 2 - 1,0 × 10 8 копия / ml от пробата.

Руски синоними

Хепатит С вирус (HCV), количествено определяне на РНК.

Синоними английски

Вирусна РНК на хепатит С, количествен, PCR в реално време, кръв, вирусен товар на HCV, вирус на хепатит С RNA Quant.

Метод на изследване

Полимеразна верижна реакция с обратна транскрипция в реално време.

Какъв биоматериал може да се използва за изследване?

Как да се подготвим правилно за проучването?

Не пушете в продължение на 30 минути, преди да дарите кръв.

Обща информация за проучването

Хепатит С вирус (HCV) е вирус, съдържащ РНК, от семейство Flaviviridae, който засяга черния дроб. Той е в състояние да се размножават в кръвните клетки (неутрофили, моноцити и макрофаги, В лимфоцити) и индуцира криоглобулинемия, болест на Сьогрен, и В-клетъчен лимфопролиферативно заболяване. HCV поради високата мутационна активност е в състояние да избегне ефектите на защитните механизми на имунната система. Има 6 генотипове и много подтипове, които имат различни стойности на прогнозата на болестта и ефективността на антивирусна терапия.

Основният начин за предаване на инфекцията е чрез кръвта (препарати за трансфузия на кръвни и плазмени елементи, донорни органи, нестерилни спринцовки, игли, инструменти за татуиране, пиърсинг). Вероятно инфекция по време на сексуален контакт и дете от майката по време на раждане, но това се случва рядко.

Остър вирусен хепатит, като правило, се характеризира с асимптоматичен курс и остава недиагностициран в повечето случаи. Само 15% от заразените хора имат остро заболяване - с гадене, болки в тялото, липса на апетит и загуба на тегло (рядко придружени от жълтеница). В 60-85% от заразените развиват хронична инфекция, която е 15 пъти по-висока от честотата на хроничен хепатит В. Хроничен хепатит С настъпва с повишаване на чернодробните ензими и лошо проява на симптоми. В 20-30% от пациентите, болестта води до цироза на черния дроб, което повишава риска от чернодробна недостатъчност и хепатоцелуларен карцином.

Откриването на HCV РНК показва пролиферацията на вируса в организма и е метод за диагностициране на заболяването. Генетичния материал на вируса може да бъде открит чрез PCR в 10-12 дни след инфекцията - в този период, специфичните антитела, които се произвеждат в няколко месеца след инфекцията и не чернодробна функция са в рамките на референтен диапазон.

Чрез PCR вирусната РНК се открива качествено или количествено. Поради качествения метод се потвърждава наличието на вируса на хепатит С и активното му възпроизводство. Количественото определяне на вирусното натоварване, като се вземе предвид HCV генотипът, позволява да се контролира текущата терапия и да се предскаже хода на заболяването.

Ефективността на лечението се оценява с количеството на РНК преди и по време на лечението. Обикновено вирусният товар на кръвта намалява няколко пъти през първите три месеца на успешното лечение. При ефективна терапия виремията намалява с два порядъка на мащаба през първите 4-12 седмици от лечението и след прекратяване на терапията не се открива генетичният материал на вируса в кръвта. Липсата на намаляване на виремията след 12 седмици от началото на лечението показва неефективност. Препоръчва се анализът да се извърши преди началото на лечението, на 4-та, 12-та и 24-та седмица от лечението и 24 седмици след края на курса. Продължителността на терапията и честотата на количественото определяне на РНК на вируса на хепатит С зависи от генотипа на вируса и степента на увреждане на черния дроб.

За какво се използва изследването?

  • За да потвърдите диагнозата "вирусен хепатит С".
  • Да се ​​предскаже хода на вирусния хепатит С.
  • Да следи антивирусната терапия и да разгледа въпроса за по-нататъшните тактики за лечение.

Кога е възложено изследването?

  • С качествено откриване на РНК на вируса на хепатит С.
  • При остър и хроничен вирусен хепатит С.
  • С смесен хепатит.
  • При планиране, по време и след края на антивирусната терапия.

Какво означават резултатите?

  • Не е открито - РНК на вируса на хепатит С не е открита или стойността е под границата на чувствителност на метода (200 копия / ml = 400 IU / ml).
  • копия / ml (IU / ml) - РНК на вируса на хепатит С беше открита. Ниска виремия (най-благоприятната прогноза за хода на заболяването и ефективността на терапията).
  • > 2 * 10 ^ 6 копия / ml (> 4 * 10 ^ 6 IU / ml) - РНК на вируса на хепатит С е открита. Висока виремия.
  • > 1.0 * 10 ^ 8 копия / ml (> 2 x 10 8 IU / ml) - РНК на вируса на хепатит С е открита при концентрации над линейния концентрационен диапазон.

Линейни концентрации РНК гама HCV С определени откриване термоциклер, е 7,5 х 10 2 - 1.0 х 10 8 копия / мл (1,5 х 10 2 - 3 х 10 8 IU / мл).

Какво може да повлияе върху резултата?

Неуспешен резултат може да се получи с:

  • замърсяване на биоматериали;
  • наличие в пробата на инхибитори - химични и протеинови вещества, засягащи различни компоненти на PCR;
  • наличие в кръвта на хепарин.

Важни бележки

  • Нивото на вирусното натоварване в кръвта не показва степента на увреждане на черния дроб и тежестта на заболяването. За тяхната оценка е необходимо да се изследват биохимичните показатели и биопсичните материали.
  • При планиране на лечението е много важно да се определи генотипът на вируса на хепатит С.

Препоръчва се също

Кой определя изследването?

литература

  • Vozianova Zh.I. Инфекциозни и паразитни болести: В 3 тона - К.: Здраве, 2000. - Т.1: 600-690.
  • Кишку АА Имунологични и серологични изследвания в клиничната практика. - М.: MIA LLC, 2006. - 471-476 стр.
  • Принципите на вътрешната медицина на Харисън. 16-ти издание. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
  • Lerat H, Rumin S, Habersetzer F и др. In vivo тропизъм на геномни последователности на вируса на хепатит С в хематопоетични клетки: влияние на вирусното натоварване, вирусния генотип и клетъчния фенотип. Кръв. 1998 15 май 91 (10): 3841-9.PMID: 9573022.
  • Revie D, Salahuddin SZ. Типове човешки клетки, важни за репликацията на вируса на хепатит С in vivo и in vitro: стари твърдения и настоящи доказателства. Virol J. 2011 Jul 11; 8: 346. doi: 10.1186 / 1743-422Х-8-346. PMID: 21745397.

Хепатит с RNA позитивен, че това означава

HCV - кръвен тест - какво е това?

Едно от най-сложните и широко разпространени болести в края на миналия век е инфекцията с вируса на хепатит C. В развитите страни разпространението на болестта е 2%, докато общият брой на пациентите по света е 500 милиона души. Инфекцията е открита много по-късно от предшествениците си: хепатит А и В - и най-напред не е наречена нито инфекция А, нито В. Заедно с нарастването на наркоманиите броят на заразените хора расте всяка година. Причината за всичко е начинът на инфекция: с интравенозно инжектиране на лекарството.

Също така, вирусът се предава по време на раждане от майка на дете, ако е имало увреждане на кожата. Така че е толкова важно да знаете, HCV кръвен тест - какво е това? При бременност е необходимо да се премине към всяка бъдеща майка. Това заболяване е лидер сред причините, които изискват трансплантация на пациент с чернодробно заболяване.

Как се развива хепатит С?

Инфекцията с вируса на хепатит С възниква, както следва: кръвта на болно лице трябва да попадне в кръвта на здрав човек. Първият кръвен поток отвежда частиците на вируса, разтворени в здрава кръв, в черния дроб и след това възпроизвеждането започва. В този случай, човешкия черен дроб страда двойно: от една страна, чернодробните клетки са повредени активността на вируса, а от друга - на човешкото тяло започва да се бори: го изпраща на имунния отговор, а именно специални-лимфоцитите са клетките, които ще бъдат призовани да унищожи заразените чернодробни клетки.

Признава имунната система на вируса от съдържанието на чужд генетичен материал. Всеки, който е преживял това, както и някои задължителни пациенти, знаят какво означава HCV кръвен тест. Това, че те са много важни показатели както на етапа на откриване, така и на етапа на лечение, всеки ще каже, макар че един ден се изправи пред този проблем.

Кога е HCV анализът?

Когато пациентът има оплакване за черния дроб, лекарите обикновено предписват кръвен тест за такъв пациент с HBS и HCV. За да се определи дали заболяването е причинено от наличието в кръвта на вируса на хепатит С или други съпътстващи заболявания, е необходим кръвен тест за HCV. Какъв е този показател?

Анализът разкрива антитела в човешката кръв, които могат да принадлежат към един от 2 класа:

  • Антитела срещу HCV. Те са основният маркер. Наличието на инфекция в тялото се потвърждава, когато се открие HCV РНК. Тези антитела се намират на етапа на възстановяване и могат да продължат да бъдат в кръвта още 1-4 години. Основният индикатор за наличието на хроничен хепатит е нарастващата честота на анти-HCV.
  • Нивото на IgA, IgM, IgG в кръвния серум. Увеличаването на показателите на тези маркери предполага увреждане на черния дроб при излагане на алкохол, с цирзова билярда и някои други заболявания.

За какво говорят маркерите?

От момента на получаване на антигена в човешкото тяло, HCV кръвен тест може да бъде открит още на 4-5 седмица. Че вирусът на хепатит С не може да бъде точно казано. Тези данни са необходими, за да може лекарят да вземе решение относно необходимостта такъв пациент да предприеме антивирусна терапия. Особено, ако в кръвта има по-малко от 750 РНК копия за 1 ml кръв, това показва минимална вирусна атака.

Антителата на хепатит C винаги се отнасят до един от двата класа - G или M, чиито данни задължително трябва да бъдат въведени в HCV кръвния тест. Обяснението обяснява тези параметри като имуноглобулинови клас G (IgG) и М (IgM). Положителният резултат на първия маркер все още не показва специфична диагноза. Класът имуноглобулин G достига максималните стойности за 5-6 месеца от момента на инфекцията в организма и остава същият при хроничен хепатит.

Класът имуноглобулини М може да се определи още 1-1.5 месеца след инфекцията и много бързо да достигне максималната концентрация. Има още един индикатор - анти-NS3, който с високите си показатели е недвусмислен предвестник за наличието на остър процес в организма.

Как да дарим кръв за HCV анализ?

За да дарите кръв в лабораторията, за да се определи наличието на HCV антитела, няма конкретни инструкции. Единствената препоръка на лекарите: оградата трябва да се извършва на празен стомах. Кръвта се взема от вената на тествания пациент с спринцовка за еднократна употреба.

Декодиране на индикаторите

Така че предполагаемият пациент е направил HCV кръвен тест. Какви са тези плюсове и минуси в резултата? Следната таблица ще отговори на това.

Етап на възстановяване на остър хепатит С или латентна фаза на хроничен хепатит С

Видове тестове с HCV

Има качествени и количествени тестове, които определят HCV (кръвен тест). Какво е това?

Количествените тестове се прилагат, ако долната граница достигне 500 копия на РНК на ml или 200 единици на ml. Определете тези тестове за HCV-РНК. Измерванията се извършват два пъти, тъй като данните често са различни. С положителни анти-HCV и количествени тестове дава положителен резултат при около 75% от случаите. Освен това, като резултат може да се получи в почти 95% от пациенти с остър или хроничен хепатит С. Тези тестове, използвани при диагностицирането на остри инфекции, както и в имунодефицитни пациенти с антитяло тест даде отрицателен резултат, обаче, има съмнение за присъствие на HCV инфекция.

Качествените тестове са по-чувствителни, долната граница е 100 РНК копия на 1 ml. Използва се за установяване на диагнозата на остра HCV инфекция чрез извършване на кръвен тест за HCV. Положителен резултат може да бъде открит още през първите две седмици след инфекцията. Качественият тест е различен, тъй като може да даде и фалшив положителен или фалшиво-отрицателен резултат.

Добавете коментар

Кръвен тест за HCV: какво означава това и кога е предписано?

Анализ на кръв за HCV - един от методите за диагностициране на хепатит С вирус Тестът се определя, когато симптомите на хепатит С, повишени чернодробни ензими, както и изследвания на хора с риск за инфекция с вирусен хепатит. В последния случай, във връзка с кръвен тест за HCV извършва кръвен тест HBs Ag.

HCV (вирус на хепатит С вируса на хепатит С) принадлежи към семейството на флавивируси. За първи път е открита през 1988 г. от група изследователи от американската биотехнологична компания Хирон. Геномът на HCV е представен от молекула на РНК, така че скоростта на мутация на вируса е много висока. На хората, заразени с вируса на хепатит С, се откриват вирусни частици, чиито геноми се различават с 1-2%. Тази особеност на популацията на вируса й позволява успешно да се възпроизвежда, независимо от защитните реакции на човешкия имунитет. Разликите в генома на вируса могат да повлияят на хода на инфекцията и резултатите от лечението.

Според Световната здравна организация досега вирусът на HCV е заразил около 150 милиона души, всяка година хепатит С вирус причинява смъртта на повече от 350 000 пациенти.

Методи за предаване на хепатит С

Вирусът на хепатит С се предава от заразена кръв, като получателят на донор на кръв или органи от заразено майката на детето, чрез сексуален контакт, като се използват нестерилни спринцовки в настройките и инструменти за здравеопазване за татуировка и пиърсинг салони.

Болестта може да се появи в остра форма, продължаваща няколко седмици и в хронична форма, което може да доведе до рак или цироза на черния дроб.

HCV-анализ на кръвта: какво означава това от гледна точка на имунологията?

Кръвният тест за HCV се основава на откриването на специфични IgG и IgM имуноглобулини, така че този вид изследване понякога се нарича анти-HCV кръвен тест. Имуноглобулините са специфични протеини на имунната система, произвеждани от В-лимфоцити в отговор на откриването на чужди протеини в организма. Когато се инфектират с вируса на хепатит С, имуноглобулините се произвеждат, за да покрият протеините на вируса, ядрото на нуклеокапсид и неструктурираните NS протеини. Появата на първите антитела към вируса се извършва не по-рано от 1-3 месеца след инфекцията. Съгласно откритите антитела, лекарят може да определи фазата на инфекцията (остра, латентна или реактивираща). Специфични антитела срещу хепатит С могат да бъдат открити дори след 10 години след заболяването, но тяхната концентрация е ниска и не са в състояние да се предпазят от повторна инфекция с вируса.

PCR-изследване за хепатит С: видове, индикации, препис

Вирусният хепатит С е сериозно заболяване, което се проявява при чернодробно увреждане. В осемдесет процента от пациентите преминава в хронична форма. Вирусът се умножава в чернодробните клетки - хепатоцити - и причинява тяхната смърт. Мъртвата тъкан се замества с фокуси на съединителната тъкан, развива се фиброза.

С развитието на чернодробна фиброза е в състояние да изпълнява функцията си, започва цироза, което е опасно за неговите усложнения: увеличаване на налягане в порталната вена, стомашно-чревно кървене, нарушена кръвосъсирването, психически промени, дължащи се на увреждане на мозъка ядра токсични продукти.

Причината за заболяването е инфекция с вирус от семейство Flaviviridae, който е вид вирус на РНК. Това означава, че генетичният материал, с който се синтезират протеините на патогена, е кодиран в молекула на рибонуклеинова киселина. Инфекцията се осъществява чрез кръвта, сексуално и от бременна жена до плода. За съжаление, между инфекцията и началото на производството на антитела може да мине доста време - от две седмици до шест месеца. Това не позволява да се определи инфекцията по метода на ензимния имуноанализ и да се започне лечение в ранните етапи.

Какво представлява PCR анализът?

PCR е метод на молекулярен анализ, който позволява откриването на генетичния материал на патогена още в първата седмица след инфекцията като се използва полимеразна верижна реакция. Проучването има висока специфика, точност и позволява не само да се определи наличието или липсата на вируса, но и неговата концентрация и генотип.

За проучването вземете кръвта на пациента, в който потенциално може да бъде открита РНК на вируса. Кръвта се добавя праймери - изкуствено синтезирани порции къса дължина на желания ген, и РНК полимераза - специален ензим, който умножава сумата на генетичен материал на патогена. С помощта на специален апарат се извършват няколко цикъла на отопление и охлаждане. След това материалът се анализира и се сравнява с известни гени на вируса, въз основа на които заключение за наличие или липса на инфекция.

Видове PCR анализ за хепатит С

Има три вида PCR анализи:

  1. Качествен PCR анализ. Първият етап от проучването. Тя ви позволява да идентифицирате генетичния материал на вируса в кръвта.

  • Количествен анализ на PCR. Тя позволява да се определи вирусното натоварване - концентрацията на генетичния материал на патогена в един милилитър кръв. Това проучване се провежда преди началото на терапията, а след това на първата, четвъртата, дванадесетата и (ако курсът е дълъг) на двадесет и четвъртата седмица от лечението, за да се оцени нейната ефективност.

  • определяне на генотипа. Причиняващият агент на хепатит С често и бързо мутира. На планетата са открити седем варианта на генотипа на този вирус. В Русия първият, вторият и третият тип са често срещани. Всеки от генотипите има различна устойчивост към терапия, например, ефективността на лечението на първия тип е 60%, а за втория и третия - до осемдесет и пет. Следователно, за да се изберат подходящи лекарства и да се предпише курс на лечение с достатъчна продължителност, е необходимо да се определи точно кой тип вирус е заразен с пациента.
  • Индикации за PCR анализ за хепатит С

    Изследването на PCR е предписано в следните случаи:

    • контакт с болно лице, което може да доведе до инфекция;
    • положителен ензимно-свързан имуноанализ;
    • признаци на чернодробна цироза: промени в черния дроб, увеличен далак, появяване на подкожен венозен плекс на корема;
    • появата на симптоми на чернодробно увреждане: болка в дясната страна на корема, пожълтяване на кожата;
    • повишена активност на ALT и AST при биохимичен кръвен анализ;
    • преди началото на лечението, за да се определи вирусното натоварване;
    • да наблюдава ефективността на антивирусната терапия;
    • след приключване на лечението за мониториране на рецидив;
    • в присъствието на диагностициран хепатит В, за да се изключи смесеното увреждане на черния дроб.

    Декодиране на PCR-изследване за хепатит С

    Декодирането на PCR анализа и ензимния имуноанализ за хепатит С трябва да се адресира от специалист по хепатология или инфекциозна болест. Анализирането на резултатите от PCR е необходимо в комбинация с биохимичен кръвен тест, биопсия и ултразвук. Само квалифициран лекар ще може да анализира резултатите от проучванията и въз основа на тях да предпише правилното лечение.

    Декодиране на качествен анализ.

    Генетичният материал на патогена е намерен в анализирания биологичен материал. Инфекцията е потвърдена.

    Няма инфекция или количеството РНК на патогена е под границата на чувствителност.

    Декодиране на количествен анализ.

    Нормална цифра за здрави хора. Това означава, че в тествания материал няма РНК на хепатит С, или неговата концентрация е под прага на чувствителността на изследването.

    Концентрацията на РНК е под диапазона на количествено определяне. Такива резултати се интерпретират много предпазливо, корелират ги с данните от други проучвания, често извършват второ проучване.

    Нивото на вирусното натоварване при дадена концентрация се счита за ниско. Обикновено намаляването на количеството на вируса означава, че терапията е успешна.

    Повече от 8 * 10 ^ 5 IU / ml

    Нивото на вирусното натоварване при дадена концентрация се счита за високо.

    Повече от 2.4 * 10 ^ 7 IU / ml

    Количеството на РНК е над горната граница на обхвата на количественото определяне. Заключение за степента на вирусното натоварване с този резултат е невъзможно. Обикновено в такива случаи изпитването се повтаря с разреждането на кръвната проба.

    Декодиране на генотипа.

    РНК от специфичен генотип е открита

    В биоматериала се открива вирус на хепатит С със специфичен генотип и подтип. Резултатът е кодиран с римски цифри и латински букви, например - 1а, 2b. Има седем генотипа и шестдесет и седем подтипа, но в Русия има само три първи типа.

    Бе открит РНК на вируса на хепатит С.

    В кръвта РНК е рядък генотип за Русия, който не може да бъде приписван на първия, втория или третия тип. Необходими са повече изследвания.

    Този резултат показва, че пациентът е здрав или че нивото на РНК на патогена е твърде малко.

    Положението е възможно, когато PCR анализът за хепатит С е отрицателен, а ензимният имуноанализ открива антитела срещу вируса. Това означава, че пациентът е имал хепатит С в остра форма и се е излекувал. Приблизително двадесет случая на инфекция водят до спонтанно излекуване, ако тялото на пациента оказва достатъчно устойчивост към инфекция.

    Въпреки факта, че PCR е много точен анализ, неговите резултати могат да бъдат изкривени в следните ситуации:

    • кръвта е транспортирана до лабораторията при неадекватни условия, температурният режим е нарушен;
    • пробата от биоматериал е била замърсена;
    • в кръвта има остатъчни следи от хепарин и други антикоагуланти;
    • В изследваното вещество са инхибитори - вещества, които забавят или спират полимеразната верижна реакция.

    Предимства на PCR при други методи

    1. Диагноза в ранните етапи. PCR открива генетичния материал на причинителя на заболяването. С помощта на имунофлуоресцентен анализ е възможно да се определят само имуноглобулини - вещества, които тялото произвежда в отговор на инфекция. В случай на инфекция с хепатит С, интервалът между инфекцията и началото на имунния отговор може да бъде няколко седмици и месеци, през което време ELISA няма да бъде ефективен. PCR ще даде отговор още през първата седмица след инфекцията.

  • Ниска вероятност за грешка. В проучвания материал се определя генетичният материал, който е характерен само за един вид патогени. Това ви позволява да изключите неверни резултати. При ELISA са възможни грешки, тъй като един и същ вид антитела може да бъде освободен срещу различни вируси - такива антитела се наричат ​​кръстосано реактивни.

  • Висока чувствителност. PCR може да открива РНК на патогена дори в минимални количества. Това прави възможно идентифицирането на скрити инфекции.
  • Как да се подготвим за доставка на кръв за PCR изследвания

    За PCR анализ се събира венозна кръв за хепатит С. Обикновено две части от кръвта се вземат от вената на пациента веднага: първата се изпраща на PCR, а втората - на ELISA. Това се прави, за да се прецени по-точно колко зле е заразен пациентът с вируса и как имунитетът се бори срещу него.

    Обикновено се изискват следните правила за пациента:

    • кръвният тест се взема сутрин;
    • прекъсването между последното хранене и предаването на кръвта трябва да бъде от осем до десет часа;
    • два или три дни преди анализа трябва да се откажете от пържени и мазни храни и алкохол;
    • за двадесет и четири часа преди анализа, пациентът трябва да избягва физическо натоварване: не носете тежести, не посещавайте фитнес зала или басейн.

    Статии Хепатит