Диагностика на вируса на хепатит С

Share Tweet Pin it

Хепатит С вирус (HCV) е RNA-съдържащ вирус от семейство Flaviviridae. Тази инфекция е способна да се възпроизвежда в кръвните клетки (моноцити, неутрофили, В-лимфоцити и макрофаги), а също и да уврежда самите клетки на черния дроб - хепатоцити. Поради високата степен на мутация, този тип хепатит е в състояние да избегне въздействието на човешката имунна система.

Има 11 генотипа и маса от подвидове на такъв вирус, които се различават по степента на увреждане на черния дроб и оказват влияние върху времето на лечение на хепатит. Такова разнообразие от хепатит С изисква различни методи за антивирусно лечение. Например, хепатитът на 1-ви и 4-ти генотип трябва да бъде лекуван 48 седмици, а за курс на лечение срещу вируси от 2-рия и 3-тия вид може да отнеме само 24 седмици.

След като бърз тест за хепатит С даде положителен резултат, се извършва PCR анализ за идентифициране на РНК на вируса в кръвни проби.

PCR диагностика

Полимеразната верижна реакция (PCR) е експериментална техника за откриване на вируси. Такъв анализ за хепатит С позволява значително увеличаване на концентрацията на някои фрагменти от ДНК или РНК вирус в представените проби. Това позволява да ги разпознаете и дори да преброите номера.

Този тест за хепатит С се провежда съгласно следната процедура:

  1. Кръвна проба (генетичен материал), която може да съдържа желания хепатитен ген, се въвежда в епруветка. На нея място специални вещества - праймери, те са сегменти от къса дължина от желания ген, които се синтезират химически. В този съд се добавя и ДНК или РНК полимераза, която е способна да изгради вериги на нуклеинова киселина, напълно идентични с оригиналната. Към получения състав се добавя селекция от свободни нуклеотиди, които са специален строителен материал за ДНК и РНК, единият от които съдържа малки частици радиоактивен фосфор.
  2. Получената смес първо се нагрява до 95 градуса, поради което се преплита в нормално състояние, и двете ДНК спирали са отслабени поради този ефект.
  3. За да продължи анализа, лекарството се охлажда, в този момент праймерите са прикрепени към желаната област на генома на хепатитния вирус, като не позволяват ДНК да се образува в двойна спирала. Когато сместа се охлади, полимеразата търси единични нишки на нуклеотиди. По време на свързването на този ензим, той се плъзга по дължината на ДНК веригата (като блок от въже) и на двойна спирала не е в състояние да "работи", за тази цел сместа се нагрява.
  4. За удължаване на анализа се извършва повторно нагряване, което отново води до отделяне на нуклеотидните вериги. При извършването на такива PCR цикли в пробата броят на търсените гена на хепатита нараства в геометрична пропорция, а останалите генетични материали се продуцират (формират) само в линейна регулярност.
  5. За да завърши изследването, разтворът се пречиства от остатъчните нуклеотидни частици. Те се разделят чрез електрофореза, като се отделят молекулните ДНК вериги чрез параметрите на молекулното тегло. Такива тестове за хепатит с помощта на PCR позволяват да се определи дали желаните гени на вируса присъстват в тестовата проба или не.

Предимството на този тест е много високият праг на чувствителност на PCR реакцията. Такава техника за провеждане на диагностика, в идеалния случай изисква само един геном на вируса за цялата проба.

В допълнение, такава PCR е напълно специфична. Във всеки от гените има уникална последователност от нуклеотиди, които като пръстов отпечатък не могат да се повтарят никъде. За този анализ на хепатит С, праймерите се синтезират по такъв начин, че да съответстват абсолютно на уникалните части на желаните гени, които няма друга последователност.

Тази техника също така дава възможност да се анализира и определи хепатит в в, като по този начин се подпомогне създаването на окончателна диагноза.

Такъв лабораторен анализ позволява получаването на информация повече от присъствието или отсъствието на HCV РНК или друг тип в кръвни проби. Определяйки параметъра на радиоактивното излъчване, има също така възможност да се разбере колко е намерен желаният генетичен материал в изследваната проба. Това ни позволява да определим параметъра на така нареченото вирусно натоварване - концентрацията на хепатитни РНК частици в определен обем.

Качествен PCR анализ

Този анализ позволява да се определи наличието на вируса на хепатита в кръвните проби. Трябва да се направи за всички хора, за които е установено, че имат антитела срещу хепатит.

В резултат на такова проучване може да има само две стойности:

  • "Установена". Подобен положителен резултат от теста се интерпретира както следва: в анализираната проба от биологичен материал се откриват фрагменти от РНК на хепатитния вирус. От това следва, че е имало факт на инфекция на пациента с този вирус. Това може да означава, че причинителят на хепатита се умножава в тялото и заразява нови клетки, унищожавайки черния дроб.
  • "Не е открит". Този резултат показва, че в пробата, която се анализира в лабораторията, бяха намерени фрагменти от РНК, което е специфично за вируса на хепатит С Има също възможност, че концентрацията на RNA вирус патоген в пробата е толкова малка, че тестът не е в състояние да идентифицира, В такива случаи се казва, че нивото на концентрация е под прага на чувствителност на анализа.

Такъв тест може също да бъде фалшиви положителен или отрицателен поради замърсяване на биологичния материал или наличието на специфични вещества в проби, взаимодействие с химически компоненти, необходими за анализа.

Трябва да се подчертае, че при острите фази на хепатит С, качествено изследване, използващо PCR метода, може да открие неговата РНК само след 1-2 седмици от момента на инфектиране на тялото. Това означава, че заболяването може да бъде идентифицирано дълго преди появата на външните му симптоми или появата на антитела срещу хепатита в организма.

Вземането на кръв (от вената) за предпочитане се извършва на празен стомах.

Количествен анализ на PCR

С помощта на този анализ определете нивото на концентрация на вируса на хепатита при пациента (вирусен товар). Такъв тест трябва да бъде представен, за да се оцени количеството на РНК на вируса в единица с определен обем.

Анализът на тестовете за хепатит с, проведени с тази техника, може да доведе до следните резултати:

  • Количествен показател (в цифри)

Концентрацията на вируса (число) се дава в цифров вид. За тази цел се използват различни единици: или ME / ml (международна единица на милилитър) или копия / ml (броя копия на вирусната РНК в милилитри). Средно 1 IU / mL съответства на 4 копия / ml, тъй като различните системи за тестване имат различни коефициенти на преобразуване за такива единици.

Ниското вирусно натоварване се счита за по-малко от 400 000 IU / ml за този анализ, а високата е 8000000 IU / ml.

Тази количествена оценка позволява да се определи степента на инфекциозност на заболяването ("инфекциозност") на пациента. Колкото повече този показател за анализ, толкова по-голям е рискът от предаване на патогена на други хора (при сексуален контакт или вертикален път).

Тази присъда означава, че количественият метод не може да открие хепатитна РНК, но самият вирус присъства в организма само в много ниска концентрация. Това се потвърждава чрез провеждане на допълнителен качествен анализ на PCR, а неговият положителен резултат показва наличието на хепатит.

  • Резултатът "Не е открит"

    Това положително тълкуване на анализа предполага, че самият количествен тест в кръвната проба не може да открие специфични РНК частици на вируса на хепатит С.

  • Количествен PCR анализ се провежда при различни етапи на антивирусна терапия (1, 4, 12 и 24 седмици) дава индикация за ефективността на лечението и да направи необходимите корекции.

    Специфичност на анализа

    Този тест трябва да бъде представен за определяне на различните генотипове на хепатит С. В момента са известни 11 генотипа на този патоген и много подвидове. Генотипите на хепатит С от 1-ви, 2-и и 3-рия вид са често срещани в нашата страна. В лаборатории може да открие различни подвидове на тези видове: 1а, 1Ь, 2а, 2Ь, или 3, 4, 5, 6 генотипове с различни модификации подтипове. За всички тези хепатити, специфичността на откриването е 100%.

    Изясняването на модификацията на генотипа дава възможност за избор на подходящо лечение. Наличие на пациента на определени видове генотип не е знак за това, че заболяването е по-лесно или по-трудно, те са само разновидности на вируса на хепатит В, а не повече.

    В случаите, когато лабораторията не може да изолира генотипа на вируса, може да бъде получен резултат: "Не е въведен текст. Изследвани са генотипове: такива и такива (например, 1а, 2b, 3av). Този транскрипт показва, че в тази лаборатория няма съответни реагенти, които да определят генотипа на вируса на хепатита. В проучването е направена проверка за вирусите, дадени в списъка, но не е открита съответствието им с РНК проби.

    За да се направи окончателна диагноза, един вид анализ е недостатъчен. Всеки от тестовете може да даде фалшив положителен резултат. Извършено е сложно изследване за определяне на точния тип хепатит и степента на инфекция с тази инфекция на тялото. Когато това се прави биопсия на черния дроб и тестването на неговите ензими: ALT, AST и ALP и LDH. Могат също да се извършат билирубинов тест и анализ на протромбиновия индекс.

    Само комплекс от такива тестове и лабораторни тестове, с общ анализ на състоянието на пациента, ще помогне да се определи наличието на хепатит в тялото, неговата форма, както и степента на тежест. Въз основа на тях лекарят може да определи по-нататъшното лечение и да направи възможна прогноза за пациента.

    РНК хепатит с количествена норма

    Вирусът на хепатит С може да се възпроизвежда в кръвните клетки и да причини лимфопролиферативни заболявания. Благодарение на множество мутации, имунната защита на организма се отслабва, появяват се генотипове и подтипове на вируса. С правилната и своевременна идентификация на определен тип зависи от ефективността на антивирусната терапия. Опасността от инфекция е, че болестта е асимптомна. Общо 15% от 100 пациенти могат да получат гадене и повръщане, загуба на тегло и повишена температура.

    Определение на вируса на хепатит С

    Стандартната норма на хепатит С е размерите от 40 до 60 nm, с по-голямата част от липидите, увреждане на черния дроб в резултат на остър или хроничен ход на заболяването. Хепатит С, а именно вирусът на RNA от фамилията Togaviridae, е изключително устойчив, предаден чрез кръвопреливане или използване на нестерилни предмети, неправилна хигиена на аксесоарите за баня, Количественият анализ ви позволява да изследвате кръвта и да идентифицирате генетичната структура на заразения вирус.

    За хепатит С и неговите генотипи, които трябва да бъдат определени, се извършва количествен анализ. В зависимост от анализатора могат да се определят три нива на разпространение на РНК вируса.

    Подтипите могат да произведат различни модификации, така че специфичността и чувствителността на анализатора трябва да бъдат сто процента. В допълнение към откриването на заболяване при пациент, е необходимо да се определи степента на неговата сериозност. Някои лаборатории нямат всички данни за определенията за вирус на РНК, има вероятност за фалшив положителен отговор.

    Изследването за хепатит С ще бъде по-точно при изучаване на такива показатели:

    ALAT, ASAT; алкална фосфатаза; LDH.

    Чертеж внимание на резултатите от тези показатели и общото състояние на организма, се показва резултата, което показва степента на заразяване, формата и броя на клетки в кръвта на хепатит С. Това допринася за лечебния процес и ефективността на антивирусната терапия.

    Видове анализи за хепатит С

    Полидираната верижна реакция (PCR) дава представа за количеството ДНК частици в анализите на пациента и правилно идентифицира причинителя на инфекцията.

    Инфекциозните агенти могат да се проявяват. Такова инфекциозно чернодробно заболяване като хепатит С, в днешно време, е лечимо, когато се открие във времето. Ако се подозира наличието на вирус, се извършва PCR анализ.

    Докато симптомите на вируса могат да бъдат маскирани за дълго време, човек може да не усети началото на хода на заболяването. Но при внимателно изследване в 60-70% от случаите се открива хепатит С, първичен анализ, при който е ELISA, след което се извършва PCR диагноза. Анализът се извършва в определени периоди, за да се определи степента на заболяването и да се предпише подходящо лечение. Правете без него, без да прилагате всички тези процедури, можете да присаждате от хепатит.

    Анализът, включително PCR диагностиката, дава картина на болестта, колко активна е вирусът в различни периоди на развитие.

    На първо място идва качествен анализ, който потвърждава само хипотезата за инфекцията и след това количествена, определяща натоварването върху черния дроб. Идеалният вариант е отрицателен резултат за хепатит С в генетичния материал на пациента.

    Качествен и количествен анализ

    Има качествени и количествени анализи. Същността на първата е, че тя определя наличието на инфекция в кръвта. И това означава, че вирусът засяга здравите чернодробни клетки. Когато пациентът има антитела срещу хепатит С, веднага се извършва качествен тест. Нормата, която трябва да произведе резултатът, "не е открита в кръвта". При определяне на концентрацията на вируса съществува необходимост от познаване на чувствителността на диагностичната система, тъй като анализът може да бъде направен от хора, подложени на антивирусна терапия. Чувствителността на анализатора не трябва да бъде по-малка от 50 IU / ml.

    Когато се открие вирус, се прави количествен анализ, с други думи вирусен товар, който определя концентрацията на вируса в кръвта и тежестта на заболяването.

    Вирусната РНК, която е в определено количество кръв, се определя като нормата със скорост 1 ml на 1 сантиметър кубичен. След количествено определяне на вирусното натоварване е възможно да се прецени степента на инфекция на незаразената среда. Веднага след като концентрацията на хепатит С се повиши в кръвта, околната среда трябва да бъде изолирана.

    Важно е на първите етапи да се открие степента на концентрация на хепатит, за да се определи темпото на рехабилитация. Ако честотата на хепатит С е превишена с повече от 800 хиляди IU / ml, тя се счита за твърде висока, с увеличение до един милион - критично. Ако количественият диапазон е по-малък от 400 хил. IU / ml, се счита, че замърсяването с други се появява с по-малка вероятност. Тази цифра показва, че хепатитът С в организма се намира в много малки дози. Анализът не е в състояние да определи количествената стойност на РНК на вирусните частици, така че е преразпределена няколко пъти за точността на диагнозата.

    Резултати от количествения анализ

    Задачата за определяне на количеството на вирусния товар в кръвта на пациента е да се определи степента на инфекция за другите.

    Анализ на хепатит С

    позволява да се оцени ефективността на антивирусната терапия, нивото на инфекциозност и броя на заразените тъкани.

    Важно е да не се допуска прогресирането на болестта, да се предприемат своевременни превантивни мерки, да се предпише правилното лечение, базирано на диагностиката на PCR. Ако според резултатите нивото на вирусното натоварване е по-малко от 400 000 IU / ml, тогава концентрацията може да е минимална, което показва възможно пълно възстановяване. Нормата за положителен резултат е липсата на инфекция.

    Резултати от PCR анализ:

    Положителният отговор означава, че има наличие на инфекция в биологичния материал. Анализът ви позволява да определите точния брой на заразените клетки. Отрицателният отговор показва липсата на инфекция, която беше внимателно претърсена в тялото.

    Количественият метод за хепатит С е точен и информативен, извършен върху оборудване с висока чувствителност. Разделянето на резултатите от анализа ви позволява да разберете дали има инфекция и нейната специфичност, за да видите най-малкия брой заразени клетки на анализатори с висока чувствителност.

    Фалшивите положителни или противоположни резултати от анализа рядко дават, по-често се случва в проучвания на имуноанализ.

    Напоследък в търсачките на интернет ресурси често се появява заявката "количествен анализ на хепатита с декодиране".

    В действителност, хепатитният вирус е чест и опасен, болестта засяга черния дроб. Името му идваше от латвийката. хепатит - възпаление на черния дроб. Инфекцията се случва чрез кръвта или чрез сексуален контакт, възрастни са по-склонни да се разболеят на възраст от 25 до 50 години.

    Има няколко вида болести. Хепатит С няма ярък израз, но в 40-70% от случаите той преминава в хронична форма, може да причини цироза на черния дроб и рак. Това заболяване изисква точна диагноза и тълкуване на получените данни, за които се разработват методите. Едната е РНК анализ на HCV РНК чрез PCR.

    РНК анализ на HCV РНК чрез PCR

    РНК (рибонуклеинова киселина) е вид макромолекула, един от компонентите на живата клетка. РНК отговаря за кодирането на генетичната информация. Вирусът на хепатит С съдържа РНК молекула и има навика да мутира. Има шест от неговите подтипове, както и много подвидове.

    Болестта в хроничния стадий води до фиброза на черния дроб - нарастват съединителните тъкани, структурата на органа постепенно се нарушава. Фиброзата се поддава на своевременно лечение, тъй като черният дроб не е претърпял все още разрушителни процеси. За разлика от цирозата, тежко необратимо чернодробно заболяване, при което фиброзата може да се развие, без да се вземат необходимите мерки навреме.

    Лице, което има подозрение, че има вирус на хепатит, определя антитела срещу него. Ако те не са налице - заболяване се изключва, в тяхно присъствие прибягват до метод PTSR (полимерна верижна реакция). В молекулярната биология тя е експериментална, но заема водещо място сред методите за диагностициране на инфекциозни заболявания. С помощта на него може значително да се увеличи концентрацията на фрагменти от молекули в пробата. 10 дни след заразяването, РНК вече е възможно да се открие в кръвта.

    Този метод е единственият, който позволява да се идентифицира болестта в ранните етапи. По друг начин (напр. Биохимичен кръвен тест) това не може да се направи, тъй като черният дроб все още не е засегнат.

    Анализите за хепатит С с декодиране (PCR) са надежден показател за наличието на вируса в кръвта на човек.

    Методът е открит през 1993 г. от биохимика Кари Мълис, за която получава Нобелова награда. PCR е пробив в медицината и науката, тъй като позволява бърза и точна идентификация на инфекции в кръвта и други биологични материали на човек. С други думи, методът ускори развитието на диагнозата на инфекциозни заболявания.

    РНК анализът на HCV РНК чрез PCR е ефективен поради следните причини:

    Има добра чувствителност - дори се открива малко количество вирус в кръвта; самият вирус се определя, а не страничните продукти, създадени от него; се определя видът патоген.

    Разлики в количествения анализ на HCV РНК от качествен

    Методът на PCR включва два основни метода за изучаване на биологичен материал за търсене на вируса на хепатит С:

    Тези проучвания имат различни задачи.

    Качествен анализ на хепатита с декодиране потвърждава наличието на вируса, след като антителата към болестта вече са открити в кръвта. Ако проучването даде положителен резултат, тогава заболяването е установено. С други думи, човек е заразен. Ако се получи отрицателен резултат, това означава, че лицето не е заразено или има твърде малко концентрация на вируса. Тази концентрация не се открива по този начин.

    Освен това клиничната картина на заболяването се основава на маркери за хепатит С и тълкуване на анализа. Основните маркери са имуноглобулините (антителата) М и Ж. Тяхното присъствие в кръвта на пациента показва нехарактерни процеси за здрав организъм. Въз основа на наличието на тези антитела пациентът обикновено се диагностицира с първична диагноза.

    Количествен анализ се предписва за първоначално откриване на антитела и, ако е необходимо, за лечение.

    Също така се предписва количествен анализ за хепатит С за откриване на смесен хепатит (инфекция с няколко вируса).

    Количественият анализ с декодиране се осъществява с цел:

    изясняване на окончателната диагноза; подреждане на прогнозите относно хода на заболяването и неговото лечение - удължаване, намаляване на лечението или промяна в тактиката; мониторинг на терапията.

    Международен ME / ml показва, че количеството на РНК в 1 ml от кръвта се изследва. Високият количествен показател показва повишена вероятност за инфекция на друго лице.

    За да сте сигурни, че резултатите са верни, трябва да следвате предписания режим, преди да дарите кръвта:

    дойдете в лабораторията на празен стомах, последният път, когато можете да приемате храна, може да бъде 8 часа преди процедурата; два дни преди изследването са забранени алкохолът, мазнините и пържените храни; ултразвук, масаж, физиотерапия преди изследването не може да се проведе; за деня, приемането на лекарства е забранено, ако приемането на отделни лекарства не може да бъде отменено, това се съобщава преди вземане на кръвни проби; преди процедурата се препоръчва максимално да се намалят физическите и нервните натоварвания.

    Изпълнението на тези изисквания ще бъде ключът към получаване на правилните резултати от количествения анализ за хепатит С.

    Декодиране на количествен анализ

    След получаване на индикаторите за количествен анализ е необходимо да се разчитат резултатите от тестовете за хепатит С. Резултатите се изчисляват както в единици ME / ml, така и в копия на ml. За да се получат резултатите, отразени в копието, се използват няколко метода.

    HCV монитор (конверсионен фактор за ME - 2,7); LCX HCV РНК (конверсионният фактор за ME е 3.8).

    Таблица. Декодиране на количествен анализ на HCV РНК чрез PCR.

    Какво представлява РНК на вируса на хепатит С?

    Изследването на РНК на вируса на хепатит С е най-важната процедура, която позволява определянето на продължителността и методите за лечение на пациенти с голяма точност. Диагнозата на заболяването се състои от няколко различни кръвни теста, като:

    • маркери на хепатит С (анти-HCV);
    • откриване на РНК на вируса на хепатит С (HCV РНК).

    Първото проучване се прави с първото подозрение за хепатит. Вторият вариант е най-значим при лечението на HCV РНК, затова го разгледайте по-подробно.

    Какво представлява вирусният хепатит C?

    Вирусният хепатит С или HCV е инфекциозно заболяване, което засяга черния дроб. Заразяването с вируса се осъществява чрез кръвта. Може да се заразите с кръвопреливане, когато правилата за стерилизация на медицински инструменти не се спазват. Има по-малко случаи, когато заболяването се получава по полов път или от бременна майка до плод. Хепатит С е от 2 вида.

    Хроничният хепатит С е най-опасен. Това е форма на болест, която може да продължи цял живот. Това води до сериозни проблеми във функционирането на черния дроб, като цироза или рак. При 70-90% от заразените хора болестта преминава в хроничен стадий.

    Най-важната опасност от хепатит C е, че той преминава тайно, без иктерични признаци. В този случай, често се оплакват от вдигането на температура, гадене и повръщане, физическа слабост, умора, загуба на апетит и тегло. По този начин срещу малък уплътнение чернодробна тъкан се среща достатъчно често злокачествена трансформация. По тази причина вирусният хепатит С често се нарича "бомба със закъснител" или "любящ убиец".

    Друга особеност на болестта е нейното много бавно развитие, което се оценява на десетки години.

    По правило заразените не чувстват никакви симптоми и не подозират истинското си състояние. Често заболяването може да бъде идентифицирано само когато се отнася до лекар по друг въпрос.

    Рисковата група включва:

    • деца, които са получили вирус на хепатит С от майки;
    • наркомани;
    • хора, които са пробили части от тялото или са правили татуировки нестерилни инструменти;
    • получава донорска кръв или органи (до 1992 г., когато не е извършена хемодиализа);
    • хора, заразени с ХИВ;
    • Медицински работници в контакт с заразени пациенти.

    Определяне на РНК на хепатит С

    Определяне на хепатит С вирус РНК, също наречен хепатит С PCR, това проучване на биологичния материал (кръв), с която може да се идентифицира в тялото на първичната наличието на вируса genomateriala хепатит В (даден вирус е единична частица от РНК).

    Основният метод за изпитване е PCR или метод на полимеразна верижна реакция.

    Има два вида кръвни тестове за определяне на HCV РНК:

    Тест за качество

    Провеждането на качествен анализ дава възможност да се определи дали вирусът е в кръвта. Всички пациенти, които имат С-хепатитни антитела, трябва да преминат този тест. Със своите резултати можете да получите 2 отговора: "налице" или "липсва" вируса. При положителния резултат от теста (намерен) е възможно да се прецени активното умножение на вирус, който заразява здравите клетки в черния дроб.

    Изпитването, извършено за висококачествена PCR, е настроено на специфична чувствителност от 10 до 500 IU / ml. Ако в кръвта на вируса на хепатит В в специфичното съдържание на по-малко от 10 IU / мл, откриване на вируса може да бъде невъзможно. Много ниска стойност на специфичното съдържание на вируса се наблюдава при пациенти, за които е предписана антивирусна терапия. Ето защо е важно чувствителността на медицинската система да е висока за диагностициране и определяне на качествен резултат в полимеразна верижна реакция.

    Често полимеразната верижна реакция на С-хепатита се извършва веднага след намирането на съответните антитела. Следващите тестове, когато преминава антивирусната терапия, се провеждат на 4-та, 12-та и 24-та седмица. Друг анализ след прекратяването на PVT се извършва след 24 седмици. След това - веднъж годишно.

    Количествено изпитване

    Количественият анализ на PCR РНК, понякога наричан вирусен товар, определя концентрацията (специфичното съдържание) на вируса в кръвта. С други думи, вирусният товар се дефинира като определено количество вирусна РНК, която може да бъде в определено количество кръв (обичайно е да се използва 1 ml, равен на 1 cm в куб). Единиците за резултатите от теста са международни (стандартни) единици, разделени на един милилитър (IU / mL). Съдържанието на вируса понякога изглежда различно, зависи от лабораториите, където се провежда изследването. За хепатит С, количественото определяне понякога използва стойности като копия / ml.

    Трябва да се разбере, че няма специфична зависимост от тежестта на С-хепатита върху концентрацията на този щам в кръвта.

    Проверката на "вирусния товар" ви позволява да определите степента на инфекциозност на заболяването. Така че рискът от заразяване с вируса на друг човек се увеличава с увеличаване на концентрацията на хепатит в кръвта. В допълнение, високото съдържание на вируса намалява ефекта от лечението. Следователно, малък вирусен товар е много благоприятен фактор за успешно лечение.

    Освен това тестът за хепатит С и неговото определяне чрез PCR играят голяма роля при прилагането на терапия срещу болестта и определяне на успеха на лечението. Въз основа на резултатите от теста се планира рехабилитационния курс. Например, при твърде бавно намаляване на специфичната концентрация на вируса на хепатит, антивирусната терапия се удължава и обратно.

    В съвременната медицина се смята, че товарът е повече от 800000 ME / ml е висок. Натоварването е повече от 10000000 ME / ml, което се счита за критично. Но експертите от различни страни и до днес не са имали същото мнение относно границите на вирусния товар.

    Честота на количественото изпитване

    Като цяло количественият анализ за хепатит се извършва преди антивирусната терапия и 3 месеца след края на лечебните процедури, за да се определи качеството на терапията.

    В резултат на количественото изпитване се счита количествена оценка на резултатите от посочената по-горе проба. В резултат на това няма да бъде направена присъда "под измерения диапазон" или "в кръвта няма да бъде открита".

    Параметърът на чувствителността на качествения тест обикновено е по-нисък от чувствителността на количествения анализ. Липсващият протокол показва, че и двата типа анализи не са открили РНК на вируса. При теста "под измерения обхват" количественият анализ вероятно не откри хепатитна РНК, въпреки че това потвърждава наличието на вирус с много малко специфично съдържание.

    Хепатит C и неговите генотипове

    Определянето на генотипа на вируса на хепатит С РНК диагностициране на наличието на различни генетични видове хепатит С. Науката не познава повече от 10 вида генома на вируса, но за медицинската практика достатъчно разграничат няколко генотипове, които имат най-голям дял в региона. Определянето на генетичния тип играе ключова роля при избора на времето за лечение, което е много необходимо, ако се вземе предвид широк спектър от странични ефекти на хепатитните лекарства.

    Методи за лечение на вирусен хепатит С

    Единственият ефективен начин за лечение на вируса на хепатит обикновено е комбинация от 2 лекарства: интерферон-алфа заедно с рибавирин. Отделно, тези лекарства не са толкова ефективни. Препоръчваната доза лекарства и времето на приложение трябва да се предписват само от лекаря и поотделно за всеки пациент. Лечението с тези лекарства може да продължи от 6 до 12 месеца.

    Днес лекарствата не са изобретени, които гарантират 100% възстановяване от вируса. Въпреки това, при правилно избрано лечение лечението на пациентите може да достигне до 90% от броя на случаите.

    PCR-изследване за хепатит С: видове, индикации, препис

    Вирусният хепатит С е сериозно заболяване, което се проявява при чернодробно увреждане. В осемдесет процента от пациентите преминава в хронична форма. Вирусът се умножава в чернодробните клетки - хепатоцити - и причинява тяхната смърт. Мъртвата тъкан се замества с фокуси на съединителната тъкан, развива се фиброза.

    С развитието на чернодробна фиброза е в състояние да изпълнява функцията си, започва цироза, което е опасно за неговите усложнения: увеличаване на налягане в порталната вена, стомашно-чревно кървене, нарушена кръвосъсирването, психически промени, дължащи се на увреждане на мозъка ядра токсични продукти.

    Причината за заболяването е инфекция с вирус от семейство Flaviviridae, който е вид вирус на РНК. Това означава, че генетичният материал, с който се синтезират протеините на патогена, е кодиран в молекула на рибонуклеинова киселина. Инфекцията се осъществява чрез кръвта, сексуално и от бременна жена до плода. За съжаление, между инфекцията и началото на производството на антитела може да мине доста време - от две седмици до шест месеца. Това не позволява да се определи инфекцията по метода на ензимния имуноанализ и да се започне лечение в ранните етапи.

    Какво представлява PCR анализът?

    PCR е метод на молекулярен анализ, който позволява откриването на генетичния материал на патогена още в първата седмица след инфекцията като се използва полимеразна верижна реакция. Проучването има висока специфика, точност и позволява не само да се определи наличието или липсата на вируса, но и неговата концентрация и генотип.

    За проучването вземете кръвта на пациента, в който потенциално може да бъде открита РНК на вируса. Кръвта се добавя праймери - изкуствено синтезирани порции къса дължина на желания ген, и РНК полимераза - специален ензим, който умножава сумата на генетичен материал на патогена. С помощта на специален апарат се извършват няколко цикъла на отопление и охлаждане. След това материалът се анализира и се сравнява с известни гени на вируса, въз основа на които заключение за наличие или липса на инфекция.

    Видове PCR анализ за хепатит С

    Има три вида PCR анализи:

    1. Качествен PCR анализ. Първият етап от проучването. Тя ви позволява да идентифицирате генетичния материал на вируса в кръвта.

  • Количествен анализ на PCR. Тя позволява да се определи вирусното натоварване - концентрацията на генетичния материал на патогена в един милилитър кръв. Това проучване се провежда преди началото на терапията, а след това на първата, четвъртата, дванадесетата и (ако курсът е дълъг) на двадесет и четвъртата седмица от лечението, за да се оцени нейната ефективност.

  • определяне на генотипа. Причиняващият агент на хепатит С често и бързо мутира. На планетата са открити седем варианта на генотипа на този вирус. В Русия първият, вторият и третият тип са често срещани. Всеки от генотипите има различна устойчивост към терапия, например, ефективността на лечението на първия тип е 60%, а за втория и третия - до осемдесет и пет. Следователно, за да се изберат подходящи лекарства и да се предпише курс на лечение с достатъчна продължителност, е необходимо да се определи точно кой тип вирус е заразен с пациента.
  • Индикации за PCR анализ за хепатит С

    Изследването на PCR е предписано в следните случаи:

    • контакт с болно лице, което може да доведе до инфекция;
    • положителен ензимно-свързан имуноанализ;
    • признаци на чернодробна цироза: промени в черния дроб, увеличен далак, появяване на подкожен венозен плекс на корема;
    • появата на симптоми на чернодробно увреждане: болка в дясната страна на корема, пожълтяване на кожата;
    • повишена активност на ALT и AST при биохимичен кръвен анализ;
    • преди началото на лечението, за да се определи вирусното натоварване;
    • да наблюдава ефективността на антивирусната терапия;
    • след приключване на лечението за мониториране на рецидив;
    • в присъствието на диагностициран хепатит В, за да се изключи смесеното увреждане на черния дроб.

    Декодиране на PCR-изследване за хепатит С

    Декодирането на PCR анализа и ензимния имуноанализ за хепатит С трябва да се адресира от специалист по хепатология или инфекциозна болест. Анализирането на резултатите от PCR е необходимо в комбинация с биохимичен кръвен тест, биопсия и ултразвук. Само квалифициран лекар ще може да анализира резултатите от проучванията и въз основа на тях да предпише правилното лечение.

    Декодиране на качествен анализ.

    Генетичният материал на патогена е намерен в анализирания биологичен материал. Инфекцията е потвърдена.

    Няма инфекция или количеството РНК на патогена е под границата на чувствителност.

    Декодиране на количествен анализ.

    Нормална цифра за здрави хора. Това означава, че в тествания материал няма РНК на хепатит С, или неговата концентрация е под прага на чувствителността на изследването.

    Концентрацията на РНК е под диапазона на количествено определяне. Такива резултати се интерпретират много предпазливо, корелират ги с данните от други проучвания, често извършват второ проучване.

    Нивото на вирусното натоварване при дадена концентрация се счита за ниско. Обикновено намаляването на количеството на вируса означава, че терапията е успешна.

    Повече от 8 * 10 ^ 5 IU / ml

    Нивото на вирусното натоварване при дадена концентрация се счита за високо.

    Повече от 2.4 * 10 ^ 7 IU / ml

    Количеството на РНК е над горната граница на обхвата на количественото определяне. Заключение за степента на вирусното натоварване с този резултат е невъзможно. Обикновено в такива случаи изпитването се повтаря с разреждането на кръвната проба.

    Декодиране на генотипа.

    РНК от специфичен генотип е открита

    В биоматериала се открива вирус на хепатит С със специфичен генотип и подтип. Резултатът е кодиран с римски цифри и латински букви, например - 1а, 2b. Има седем генотипа и шестдесет и седем подтипа, но в Русия има само три първи типа.

    Бе открит РНК на вируса на хепатит С.

    В кръвта РНК е рядък генотип за Русия, който не може да бъде приписван на първия, втория или третия тип. Необходими са повече изследвания.

    Този резултат показва, че пациентът е здрав или че нивото на РНК на патогена е твърде малко.

    Положението е възможно, когато PCR анализът за хепатит С е отрицателен, а ензимният имуноанализ открива антитела срещу вируса. Това означава, че пациентът е имал хепатит С в остра форма и се е излекувал. Приблизително двадесет случая на инфекция водят до спонтанно излекуване, ако тялото на пациента оказва достатъчно устойчивост към инфекция.

    Въпреки факта, че PCR е много точен анализ, неговите резултати могат да бъдат изкривени в следните ситуации:

    • кръвта е транспортирана до лабораторията при неадекватни условия, температурният режим е нарушен;
    • пробата от биоматериал е била замърсена;
    • в кръвта има остатъчни следи от хепарин и други антикоагуланти;
    • В изследваното вещество са инхибитори - вещества, които забавят или спират полимеразната верижна реакция.

    Предимства на PCR при други методи

    1. Диагноза в ранните етапи. PCR открива генетичния материал на причинителя на заболяването. С помощта на имунофлуоресцентен анализ е възможно да се определят само имуноглобулини - вещества, които тялото произвежда в отговор на инфекция. В случай на инфекция с хепатит С, интервалът между инфекцията и началото на имунния отговор може да бъде няколко седмици и месеци, през което време ELISA няма да бъде ефективен. PCR ще даде отговор още през първата седмица след инфекцията.

  • Ниска вероятност за грешка. В проучвания материал се определя генетичният материал, който е характерен само за един вид патогени. Това ви позволява да изключите неверни резултати. При ELISA са възможни грешки, тъй като един и същ вид антитела може да бъде освободен срещу различни вируси - такива антитела се наричат ​​кръстосано реактивни.

  • Висока чувствителност. PCR може да открива РНК на патогена дори в минимални количества. Това прави възможно идентифицирането на скрити инфекции.
  • Как да се подготвим за доставка на кръв за PCR изследвания

    За PCR анализ се събира венозна кръв за хепатит С. Обикновено две части от кръвта се вземат от вената на пациента веднага: първата се изпраща на PCR, а втората - на ELISA. Това се прави, за да се прецени по-точно колко зле е заразен пациентът с вируса и как имунитетът се бори срещу него.

    Обикновено се изискват следните правила за пациента:

    • кръвният тест се взема сутрин;
    • прекъсването между последното хранене и предаването на кръвта трябва да бъде от осем до десет часа;
    • два или три дни преди анализа трябва да се откажете от пържени и мазни храни и алкохол;
    • за двадесет и четири часа преди анализа, пациентът трябва да избягва физическо натоварване: не носете тежести, не посещавайте фитнес зала или басейн.

    Хепатитен вирус с РНК

    "Откриването на гени на вируса на хепатит С (HVC) в кръвта на пациента е вторият етап от лабораторната диагностика на тази инфекциозна патология. За откриване на агент, който няма клетъчна мембрана и съответно повърхностни антигени, се използва методът на полимеразна верижна реакция. С помощта на този метод директно е молекулата, в която се кодира цялата му генетична информация - РНК.

    РНК - Рибонуклеиновата киселина заедно с ДНК е част от клетките на всички живи организми. Вирусът на хепатит С съдържа РНК молекула и има способността да го измества.

    Проучване за наличието на HVC геном обикновено се прилага след извършване на общ, биохимичен кръвен тест и се получава положителен антитяло-отговор (анти-HVC).

    Какво означава това?

    Изследване на антитела срещу хепатит C е скрининг, т.е. той може да бъде използван за проучване на голям брой хора (лекари, бременни жени, болнични пациенти, дарители, инжекционно употребяващи наркотици, ХИВ-позитивни). Негативният резултат от лабораторния анализ на анти-HVC показва, че не е налице имунен отговор на вируса в кръвта на субекта. В такива случаи може да се получи отрицателен резултат:

    Ако човек никога не е бил заразен с хепатит С.

    Ако чувствителността на лабораторната система за изпитване е по-ниска от концентрацията на анти-HVC.

    Ако инфекцията е настъпила по-малко от 2 месеца и анти-HVC в кръвта все още не е достатъчно, за да се определи. С фалшиво отрицателен отговор поради човешкия фактор.

    Ако се получи в резултат на което на антитела срещу хепатит C пациент открити, това означава, че вирусът на хепатит С е в тялото на пациента по време на изследването или са имали кръв преди известно време. Ако положителен резултат за анти-HVC има необходимост от допълнителни лабораторни тестове, които откриват генетичен материал на патогена, се определя концентрацията на неговите гени (вирусен товар, виремия) и установяване на генотипа.

    Анализ на РНК на вируса на хепатит С.

    Геномът на HVC в лабораторията може да бъде открит, като се използват няколко изследвания:

    разклонена ДНК (р-ДНК);

    транскрипционно амплифициране (ТМА);

    полимеразна верижна реакция (PCR).

    Методът р-ДНК е евтин и прост метод за откриване на вирусния геном при голям брой анкетирани хора. Основният му недостатък е ниската чувствителност: той открива HVC само при концентрация над 500 IU / ml.

    Методът на транскрипционно амплифициране открива нуклеиновите киселини на вируса в кръвния серум. Анализът има висока чувствителност (5-10 IU / ml), но все още не е достатъчно въведен в повсеместната лабораторна практика.

    Методът PCR в Русия е най-често срещаният и достъпен лабораторен преглед с висока чувствителност (от 50-60 IU / ml).

    Тестът за PCR се провежда във всяка клинична лаборатория, която има подходяща акредитация. Много важен нюанс на този диагностичен метод, който влияе върху резултата от анализа, е чувствителността на тестовата система, използвана в лабораторията. Например, чувствителността на диагнозата 60 IU / ml, както в лабораториите Invitro, ви позволява да откривате вирусна РНК 3 месеца след инфекцията. При ниска чувствителност на тестовата система, гените на патогена не могат да бъдат открити дори след 4 месеца след заразяването.

    РНК на вируса на хепатит С: PCR метод

    Методът на PCR има много предимства пред други лабораторни тестове за откриване на HVC гени:

    висока чувствителност. Методът позволява да се определи генетичният материал на патогена дори при минималната му концентрация в пробата;

    по-голяма специфичност. Идентифицира гени на вирус със специфичен генотип сред различни ДНК и РНК на други патогени, което позволява генотипизиране на патогена;

    извършване на скорост. Липсата на дълъг процес на отглеждане на патогена намалява времето за получаване на резултата до няколко часа; универсалност на анализа.

    Универсалната процедура за изследването позволява едновременната употреба на една човешка кръвна проба за откриване на генетичния материал на различни патогени. Тези предимства позволяват PCR да се разглежда като "златен стандарт" на лабораторната диагностика на вирусен хепатит С заедно с ензимен имуноанализ за анти-HVC.

    PCR е изследване, използвано за определяне на гените на HVC в кръвта на изследваното лице. Проучването се състои от няколко етапа:

    Вземане на проби от биоматериал.

    Умножете увеличаването на концентрацията на копия на РНК в избраната проба.

    Откриване на генетичен материал с помощта на специални системи за тестване.

    След вземане на венозна кръв, пациентът се подлага на изкуствено иницииране на процеса на множествена репликация (усилване, копиране) на HVC гени.

    За тази цел температурата вътре в епруветката с биоматериал се променя няколко пъти по определен начин. Когато броят копия на РНК в епруветката достигне необходимата стойност, патогенът се открива, като се използват специални диагностични тестове.

    качество (открива наличието на вируса),

    количествено (определя концентрацията на вирусни гени на единица обем)

    генотип (установява генотипа на патогена).

    РНК на хепатит С: качествен анализ

    Задачата на качествената PCR е да се определи наличието на HVC в представения биоматериал. Това изследване обикновено се провежда за скриниране на диагнозата на заболяването или идентифициращия носител. Задайте го, след като се открие чрез анти-HVC чрез ELISA.

    За да се диагностицира хепатит С, е достатъчно да се открие качеството на HCV генетичния материал, т.е. без да се отчита концентрацията му в обема на кръвта. Резултатът от качествения PCR може да бъде: "Открита РНК" или "РНК не е открита".

    Точността на метода съответства на 95%. В същото време точността на тестово-диагностичните сами достига 100%, а 5% - човешкият фактор, който винаги присъства в лабораторните изследвания. За да се избегне фалшивият негативен анализ, особено при хора с ниска виремия, е необходима висока чувствителност на диагностичната система, използвана в проучването. Чувствителността на системата за изпитване трябва да бъде не по-малко от 60 IU / ml.

    РНК на хепатит С: количествен анализ

    Количествен анализ се предписва, когато е необходимо да се знае нивото на виремия в човешкото тяло. Показания за това изследване са:

    положителен резултат от качествения PCR при условие, че се откриват антитела срещу вируса;

    установяване на етапа на патологията;

    определението за вирусен товар при хепатит;

    избор на комбинация от антивирусни лекарства;

    Проследяване на вирусния отговор към текущата антивирусна терапия;

    оценка на вероятността от преминаване на остър хепатит С към хроничен.

    Резултатът от анализа се изразява в IU / ml (международни единици в 1 ml серум) или в копия / ml (брой копия на вирусните гени в 1 ml серум). Количественият PCR няма норма: нормално НVC генът в човешката кръв не трябва да бъде открит. Резултатите от проучването се сравняват с референтните стойности, установени за дадена степен на вирусно натоварване.

    Така че показателите (в IU / ml):

    под 4 × 10 * 5 се счита за ниска виремия;

    от 4 × 10 * 5 до 8 × 10 * 5 - средно;

    повече от 8 × 10 * 5 - висок.

    Колкото повече копия на вирусна РНК в кръвта, толкова по-агресивна е болестта и толкова по-голям е рискът от предаване на вируса на други хора. Но нивото на вирусното натоварване не е единственият индикатор, който влияе върху тежестта на хода на патологията и по-нататъшната прогноза за пациента: генотипът на патогена също е важен.

    Създаването на генотип е необходимо за назначаването на правилния режим на лечение. Той определя и прогнозата за здравето и живота на пациента. Например, вирус 3 на генотипа често води до фиброза или цироза на черния дроб, в сравнение с пациентите, които носят 1 генотип.

    Хепатит С: анализ и интерпретация

    РНК Диагнозата на хепатит С не може да бъде направена само на базата на качествена и / или количествена PCR: определянето на HVC и нивото на вирусното натоварване не е достатъчно, за да се предпише адекватна антивирусна терапия. Потенциалният пациент трябва да бъде разгледан изчерпателно (клинично, лабораторно, инструментално), за да има обективна картина на патологията. Правилно да назначи комплекс от изследвания, за да се установи диагноза хепатит С, а след това правилно дешифриране на резултатите може само лекар.

    Medinfo.club

    Портал за черния дроб

    Количествен анализ на HCV и неговото тълкуване

    Хепатит С е заболяване, което може да се възпроизведе в здрави чернодробни клетки и да провокира пролиферативни заболявания. В днешния свят, когато вируса на хепатит В е специфична мутация, имунната система на човека стои под заплаха, тъй като в сравнение с инфекцията, то е незначително. Заслужава да се отбележи, че не всички пациенти ще имат първите признаци на заболяването, особено в ранните етапи.

    RNA анализ на вируса на хепатит С - количествено изследване, чийто размер е наличието на умерено количество вирус в кръвни клетки на пациента. Според статистиката около 31% от пациентите са напълно излекувани от това заболяване, ако е в началния етап.

    В медицинската практика, лекарите казват, че 4 милиона заразени симптоми и първите признаци не се появяват, въпреки напредналите форми на хепатит може да доведе до цироза или рак.

    В момента, по време на процедурата "кръвопреливане", тази кръв се тества за наличието на вируса на хепатит С, като заболяването се предава чрез преливане на кръв.

    Досега светът вече е разработил лекарства от хепатит С с ефективност, близка до 100%. Съвременната фармацевтична индустрия е създала лекарства, които практически нямат странични ефекти. Много пациенти получават първите резултати под формата на облекчаване на симптомите и намаляване на вирусния товар след седмица на приемане. Прочетете повече за препаратите от хепатит от индийски производство в нашата отделна статия.

    На пазара на компании за транспортиране на индийската медицина за хепатит С "Sofosbuvir Express" се доказа. Тази фирма успешно помага на хората да се възстановят от заболяването повече от 2 години. Коментари и видеоклипове на доволни пациенти можете да видите тук. Те съставляват повече от 4 000 души, които се възстановяват поради закупени наркотици. Не забавяйте здравето си в дълга кутия, отидете на www.sofosbuvir-express.com или се обадете на номера 8-800-200-59-21

    Видове изследвания на PCR

    PCR (полимеразна верижна реакция) е най-модерният и ефективен метод за изучаване на гена на вируса и неговите възможности. Такава диагностика може да установи разнообразие от заболявания и да определи по-нататъшната му мутация в тялото на пациента.

    Анализът се извършва чрез вземане на кръв, която се поставя в специални реагенти, в които се извършва клониране на клетките.

    Две клетки се произвеждат от една клетка и т.н. В резултат на това се появяват стотици ДНК, благодарение на които е възможно да се диагностицира патогенът и да се идентифицира вирусът на ранен етап.

    Следователно PCR е разделена на няколко вида:

    • качествен анализ - разпознава гените на инфекцията в кръвта. Ако пациентът е потвърден за качествен анализ, трябва да се направи количествен анализ, за ​​да се установи степента на инфекция. В резултат на тази диагностика, специалистите пишат "открити / неоткрити". "Открито" - показва, че заболяването присъства в тялото и неговата РНК вече е открита. "Неоткрит" показва, че в пробата няма вирусен ген, т.е. няма хепатитна РНК. Лекарите обаче препоръчват да се проведе второ проучване след 10 дни.
    • количествен анализ - определя количеството генетичен материал на инфекцията в кръвта. Такава диагностика помага да се установи тежестта на заболяването и цялата клинична история. В резултат на такъв анализ могат да бъдат написани само "положителни / отрицателни / невалидни". "Положителен" - изобразява инфекциозния товар. Доктор метод за диагностициране посочи заболяване да се определи ефективността на лечението при 4, 12, 16 и 24 седмици bolezni.Esli вирус компонент е в обхвата 8h10t IU / мл, лечението е ефективно, ако горните параметри - не. "Отрицателен" - генът на инфекцията не е намерен. "Невалидно" - това се случва, ако генът на вируса се намира на качествен, но не е разкрит в количествен анализ. Има подобна, ако инфекцията е под нивото.

    Разлики в качествените и количествените анализи

    Вирусът на хепатит С - се диагностицира основно чрез количествен анализ, чието декодиране е необходимо за правилното тълкуване на болестта. Но въпреки това, качествен и количествен метод за диагностика имат своите различия, като например ролята и задачите на научните изследвания - качествено - потвърждава наличието на инфекции след откриването на антитела на вируса на, и количествени - вторичен метод за опровергаването или потвърждаване на болестта, за да направи правилното и само диагнозата,

    Обяснение на количествените изследвания

    След диагностицирането, само лекарите могат да интерпретират резултата, тъй като той е изобразен не трябва да бъде на числа, а на думи. Според статистиката количественият PCR е най-чувствителният анализ. За да разберем дали в организма има вирус, е необходимо да разберем и знаем, че количественият анализ за хепатит С се дешифрира чрез цифрова индикация за инфекцията:


    Статии Хепатит